赵航轲 陈 杭 马 薇 羊玉蓉 降初拉尔布 唐 瑶 唐明先

（甘孜州农业科学研究所，四川康定 626000）

羊肚菌（Morchella）隶属于子囊菌亚门（Ascomycota）、盘菌纲（Discomycetes）、盘菌目（Pezizales）、羊肚菌科（Morchellaceae）、羊肚菌属[1-3]，是世界四大珍贵食用菌之一。羊肚菌富含多种氨基酸[4]，除色氨酸外，其余必需氨基酸含量均比面包、牛奶、牛肉等的含量高，还含有39.7%的碳水化合物及24.5%的蛋白质，具有很高的营养价值[5]。此外，研究发现羊肚菌多糖和蛋白质[6]具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化和降低胆固醇等生物活性[7]，对抗肿瘤药物的研究与开发具有重要意义。

随着食用菌产业的发展，菌种的生产要求越来越高，而食用菌液体菌种具有制种周期短、成本低、易操作、纯度高、菌龄一致等优势，在金针菇、黑木耳、杏鲍菇等食用菌生产中广泛应用[8]。目前有关羊肚菌液体菌种研究较少。笔者在单因素试验的基础上，采用Box-Behnken 响应面法对羊肚菌液体发酵营养条件进行优化，以期为羊肚菌液体菌种制备及菌丝深层发酵提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试材料

（1）供试羊肚菌菌株：六妹羊肚菌（Morchellasextelata）。（2）基础培养基：葡萄糖20 g，酵母粉5 g，KH2PO41 g，VB110 mg，蒸馏水1 000 mL，pH自然。

1.2 试验方法

1.2.1 菌种活化

将保藏的羊肚菌菌种接种于平板培养基上，置于24 ℃恒温培养箱培养7 d。

1.2.2 羊肚菌液体菌种培养基组分的优化

碳源筛选：取活化后羊肚菌菌块0.5 cm2，分别接种至用玉米粉、可溶性淀粉、玉米芯粉、蔗糖、果糖、乳糖、甘露醇替代葡萄糖的液体培养基中，其余组分与基础培养基相同。250 mL 三角瓶，装液量为150 mL，pH 自然，置24 ℃、130 r/min 恒温摇床，培养7 d。菌丝体用蒸馏水清洗，置55 ℃干燥箱中烘至恒重，称量菌丝体干重，确定最适碳源，并进一步筛选出其最适质量浓度。……