消痔灵注射液介导TGF-β1/Smad信号治疗放射性直肠炎出血的分子机制研究
2021-04-02何裕智李俊
何裕智,李俊
放射治疗过程中,不可避免地会对周围组织造成损伤,导致急性或慢性放射性损伤,当直肠黏膜受损时便会引发放射性直肠炎(radiation proctitis,RP),是临床放射治疗主要并发症[1]。该病主要见于妇科恶性肿瘤或男性前列腺恶性肿瘤放射治疗,流行病学调查发现,该病五年发病率为12.3%,其中有1.1%的患者确诊为严重直肠炎[1]。便血、腹泻及肠梗阻是该病主要临床表现,病程较长,严重时可出现直肠阴道瘘或膀胱瘘,严重影响患者生存质量。研究发现[2],放射性损伤与放射性途径相关基因有关,其中转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGFβ1)基因是研究较多的与放射损伤相关的有关基因之一。TGF-β1/Smad信号通路在电离辐射导致的炎症反应中发挥重要作用[3]。因此,可设想通过阻断TGF-β1/Smad信号通路来达到治疗RP的目的。消痔灵注射液是一种中西药相结合的注射用液体,能使小动脉内血栓形成加快,具有收敛、抑菌、止血等作用[4]。本文将采用消痔灵注射液治疗放射性直肠损伤,探究该药通过TGF-β1/Smad信号通路发挥作用的分子机制。
1 材料与方法
1.1 材料来源
雄性SD大鼠40只,SPF级,6周龄,体质量200~220 g,购于成都达硕实验动物有限公司,许可证号:SCKX川2020-030。将大鼠放在室温15~25 ℃,湿度35%~60%,添加常规饮水及饲料,12 h光照,12 h黑暗,循环进行。
主要试剂及仪器:TGF-β1、Smad 2/3 抗体(Abcam,批号:ab64175、ab63399);逆转录试剂盒(RevertAid First Strand cDNA synthesis Kit)(Fermentas,批号:00130608);高纯总RNA快速提取试剂盒(Gener-ay,批号:1305G0);GAPDH Antibody(Bioworld,批号:321205);HE 染色试剂盒(北京索莱宝,批号:G1120);中性树胶(北京索莱宝,批号:G8590);北京天普UV-1600紫外分光光度计;显微镜(日本尼康,Eclipse 80i);转移脱色摇床(海门其林贝尔仪器制造公司,型号TS-8);……
