谢航，林娟

(福州大学 生物科学与工程学院，福建 福州 350108)

灵芝是我国著名的食药用菌，在我国系统描述的种类有103个种[1]，其中灵芝(Ganodermalingzhi)原称为赤芝(Ganodermalucidum)是我国灵芝属的主要种类[2]，其干燥子实体被作为法定的中药材收录于《中华人民共和国药典》当中。目前有关灵芝类的研究已逐渐成为热点，然而多数的研究者专注于灵芝的分类鉴定[3-5]、药理作用[6-8]、有效物质[9-11]、基因组和基因功能[12-15]等，而忽视研究菌株的稳定性、基因完整性的安全长期保藏，一旦由于管理或保藏技术的原因，致使菌株丢失、变异、退化，将很难持续开展后期的研究，因此，菌种的保护工作显得尤为重要。

菌种保藏的方法很多，对于食药用菌，液氮保藏是一种公认的、长久有效的保藏方法[16-17]，然而陈燕妍在对担子菌菌种24属43种122株进行液氮保藏时发现，灵芝属的菌株有较明显的失活[18]，顾金刚也指出，菌种进行液氮保藏需要对其进行优化才能得到较好的保藏效果[16]。鉴于此，本文以灵芝菌种为材料，对影响液氮保藏效果的降温速率、保护剂浓度、解冻温度、培养基质和菌饼大小等方面进行系统研究，以期掌握灵芝菌种的液氮保藏技术，使之在灵芝种质资源的保藏中得到更好地应用。

1 材料与方法

1.1 供试菌株

灵芝芝120由福建省食用菌种质资源保藏管理中心提供。

1.2 培养基

培养基1(PDA)：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，蒸馏水1 000 mL，pH自然。

培养基2：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，蛋白胨2 g，琼脂20 g，蒸馏水1 000 mL，pH自然。

培养基3：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，棉籽壳30 g，琼脂20 g，蒸馏水1 000 mL，pH自然。……