柑橘黄龙病早期诊断的PCR检测技术优化
2021-04-02董宏图王晓冬侯佩臣罗斌李爱学张晗
董宏图,王晓冬,侯佩臣,罗斌,李爱学,张晗*
(1.北京农业信息技术研究中心,北京 100094; 2.北京农业智能装备技术研究中心,北京 100094)
柑橘黄龙病(Citrushuanglongbing),又名青果病、黄梢病,素有“柑橘癌症”之称,可导致柑橘果树的生长力逐渐衰弱(10年后死亡),同时还会导致柑橘生产能力的突然丧失,是目前世界上柑橘类果树最具毁灭性的病害之一[1]。我国作为世界上的柑橘生产大国之一,该病的传播严重影响了我国柑橘产业的健康发展[2]。截至目前,全国有12个省有过柑橘黄龙病发生的报道,病害影响面积达柑橘总种植面积的80%以上[3]。由于柑橘黄龙病病菌生长在柑橘属植物韧皮部中,无法分离培养,一直不能确定其病原。直到20世纪90年代,才有相关研究确定了柑橘黄龙病病原为一种仅限于韧皮部筛管组织内寄生的革兰氏阴性细菌-韧皮部杆菌属类细菌(CandidatusLiberibacter)[4]。随后,依据其耐热性和地理分布的特性将柑橘黄龙病分为3个种:亚洲种(CandidatusLiberibacterasiaticus,Las)、非洲种(CandidatusLiberibacterafricanus,Laf)和美洲种(CandidatusLiberibacteramericanus,Lac)。其中,亚洲种耐热性最强,其次是美洲种,非洲种的耐热性最差[5]。到目前为止,我国出现并检测到的病原均为亚洲种。由于黄龙病病原体具有很长的潜伏期,并且无法分离培养,所以早期检测与防治存在较大的困难。到目前为止,黄龙病检测的方法有很多种,如传统的田间诊断、指示作物检测法、显微镜观察等,这些方法虽成本较低、简单易行,但由于植株发病症状易与其他症状发生混淆,同时植株生长状况差异较大,使得这些方法难以广泛推广[6]。……
