任天凤

异常Hb 病是因珠蛋白肽链异常合成或异常Hb 分子结构所引起的血液疾病,有遗传性质,可通过染色体进行遗传,目前已发现的类型有700 多种,约30%的患者存在Hb 功能的异常,从而出现各种不同程度的症状［1-3］。我国广东、云贵川等地是该疾病的高发地区,对育龄期人群进行异常Hb 病的筛查可提高优生优育工作的质量［4-6］,基于此,本文回顾性分析了近2 年本地区13249 例育龄期人群的筛查结果,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2019 年1 月～2020 年10 月在本院进行Hb 电泳筛查及地中海贫血基因诊断的婚育人群共13249例,其中男6124例,年龄18～55岁；女7125 例,年龄18～48 岁。其中异常Hb 病确诊75 例。纳入标准［7］：所有研究对象均进行Hb 电泳筛查提示有异常变异体区带。所有研究对象均签署知情书。

1.2 方法

1.2.1 标本采集 所有研究对象空腹抽取两支2 ml EDTA-K2 抗凝剂的静脉血,一支标本用于Hb 电泳的检测,另一支用于α 地中海贫血及β 地中海贫血基因诊断分析及珠蛋白测序。

1.2.2 仪器与试剂 样本全血中血红蛋白A2(HbA2)的含量测定以sebia Caplillarys2 全自动毛细管血红蛋白电泳仪及配套试剂进行。α 及β 地中海贫血基因型的检测选用杭州博日科技有限公司TC-96/G/H(b)基因扩增仪、广东凯普生物科技股份有限公司HB-2012A医用核酸分子杂交仪及配套试剂进行检测。若Hb 电泳检测提示有异常Hb 区带,则将样本送至凯普公司进行进一步的珠蛋白基因序列测定。

1.2.3 α 地中海贫血检测范围 α 地中海贫血基因的常规检测选择多聚酶链式反应(PCR)电泳法和PCR反向斑点杂交法,主要针对我国居民最为常见的3 种缺失型α 地中海贫血进行检测,即-α3.7、-α4.2以及--SEA,同时针对我国居民最为常见的3 种突变型α地中海贫血进行检测,即CS、QS 以及WS。

1.2.4 β 地中海贫血检测范围 β 地中海贫血基因的常规检测选择PCR 反向斑点杂交法和导流杂交法进行,主要对17 个位点的19 种突变情况进行检测,具体包括：CD41-42、CD43、IVS-Ⅱ-654、CD17、CD14-15、-28、-29、CD71-72、βE、IVS-Ⅰ-1、CD27/28、IVS-Ⅰ-5、Cap、Int、CD31、-30、-32。

1.2.5 珠蛋白基因序列测定 采用PCR 方法对α1珠蛋白基因、α2珠蛋白基因以及β 珠蛋白基因进行扩增后再进行测定。

1.3 观察指标 统计异常Hb 病筛查结果。

2 结果

13249 例婚育人群中,其中确诊为异常Hb 病携带者75 例。本地区异常Hb 病携带率为0.566%(75/13249)。其中异常Hb 基因型为α 链的共12 例,6 例为Hb Q-Thailand,1 例为Hb Wexham,1 例为Hb Handsworth,1 例为HBA1∶C.343 C＞G(异常区带在Z11),1 例为HBA1∶C.49A＞C(异常区带在Z12),1 例为HBA2∶C.91G＞C(异常区带在Z6),1 例为αα/αααanti4.2(异常区带在Z1)；异常Hb 基因型为β链的共有63 例,48 例为Hb E,2 例为Hb J-Bangkok,1 例为HBB∶C.113G＞A(异常区带在Z3),5 例为Hb NewYork,2 例为Southeast Asian thalassaemia,5 例为Chinese (Aγδβ)0 thalassaemia。见表1。

表1 75 例广东信宜地区异常Hb 病筛查结果(n,%)

3 讨论

异常Hb 病是临床常见疾病,是因遗传缺陷所导致珠蛋白肽链在合成或是结构上出现异常,引起一种或一种以上异常结构Hb,并或多或少的代替了正常的Hb,进而致病,该疾病可经染色体进行遗传,并为显性遗传,即母亲或父亲任意一方或是双方患有此病,则孩子的患病率为50%～100%。目前,临床范围内已发现异常Hb 病400 余种以及100 余种珠蛋白生成障碍性贫血疾病,但仅少数患者表现出病态［8］。临床上常见的异常Hb 病主要包括以下4 种：①不稳定Hb；②氧亲和力增高Hb；家族性紫绀症(Hb M)；④镰状细胞综合征(Hb S 病)。

超过90%的异常Hb 病是因单个氨基酸被其他氨基酸替代所致,其余患者为较为少见的双氨基酸缺失、插入、被替代,或是链融合、链延伸所致。肽链结构发生改变可对Hb 的理化性质及功能造成影响,任一珠蛋白链均可出现结构异常的情况,但其中最为常见的是β 珠蛋白链,基因变异是异常Hb 病蛋白表型的基础。世界卫生组织(WHO)估计,在全球范围内超过1 亿人存在异常Hb 病的基因,我国调查显示,异常Hb病在我国的发生率约为0.337%,在几十个民族群体中均有发病［9］。

异常Hb 病是一种珠蛋白肽链结构异常而引起的一种疾病,因此尽早进行筛查可促进优生优育工作的开展［10］。本次研究采用毛细管电泳技术对13249 例育龄期人群进行异常Hb 病的筛查,共筛查出75 例患者,检出率为0.566%,较广州地区报道的1.14%明显更低,但高于深圳地区报道的0.405%,且较我国平均发病率0.337%明显更高。信宜地区主要常见的异常Hb占比排序依次为Hb E(64%)、Hb Q-Thailand(8%)、Hb NewYork(6.6%)、Hb J-Bangkok(2.6%)。

异常Hb 分型中,本次统计发现,信宜地区α 链异常Hb 基因型以Hb Q-Thailand 为主,占比为8%,另外发现3 例未命名的α 链异常Hb。Hb Q-Thailand 的发生是因为α 珠蛋白肽链中α1基因的第74 位密码子发生突变(由GAC 变至CAC)所引起的,该分型的出现与缺失型α 地中海贫血中缺失-α4.2有关。单纯Hb Q-Thailand 杂合子时患者Hb 浓度处于正常水平,如Hb Q-Thailand 合并缺失型α 地中海贫血时,其Hb浓度会出现不同程度的降低。β 链异常Hb 基因型以Hb E 数量最多,共48 例,占比为64%,发生率为0.36%(48/13249),这与深圳、广州以及贵州地区筛查的数据相差不大,但较广州地区占比(76.12%)明显更低,这是因为有研究指出在异常Hb 病的分布中Hb E 型主要分布于我国南方地区［11］。其病理基础是因赖氨酸替代了珠蛋白β 链中第26 位的谷氨酸,进而引发一种缓慢进程的异常Hb 疾病。Hb E 合并缺失型α 地中海贫血时HbA2 水平处于正常水平,但患者Hb 浓度也出现一定程度的降低［12］。Hb NewYork、Hb J-Bangkok 是因珠蛋白基因发生点突变,造成β-珠蛋白链上氨基酸的变化,进而对Hb 的正常功能、性质造成影响,进而引起此两种分型的异常Hb 病。另外发现1 例未命名的β 链异常Hb,2 例Southeast Asian 罕见型地中海贫血,5 例Chinese (Aγδβ)0罕见型地中海贫血。可见信宜地区异常Hb 病种类多,应引起重视［13］。

综上所述,本地区异常Hb 病携带率为0.566%,虽低于南方广州地区,但明显高出我国平均水平,此次共检出异常Hb 病12 种,其中占比最高的为Hb E,占比为64%,其次为Hb Q-Thailand、Hb NewYork、Hb J-Bangkok 等类型。异常Hb 个别异常Hb 变异体如合并轻型或中间型地中海贫血,临床表型可能会出现中重度贫血,或育龄夫妇如共同患有同种异常Hb,那么将有可能生出双重珠蛋白链结构异常的贫血孩子。在异常Hb 病的筛查中,单一的血细胞分析的筛查效果不佳,而以Hb 电泳的手段,可有效进行异常Hb 病的筛查,指导婚育人群遗传咨询,可显著提高我国人口的综合素质,因此应用及推广价值高。