李戈辉， 吴 玮， 邸铭洋， 王长城， 杨桂朋， 丁海兵**

(1. 中国海洋大学海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室， 山东 青岛 266100；2. 中国海洋大学化学化工学院， 山东 青岛 266100； 3. 迪申生物技术(上海有限公司)， 上海 201201)

电泳[1]是带电粒子在电场作用下向电性相反的电极移动的过程。电泳过程中，粒子所带电荷数、分子大小、形状等各不相同，从而在电场中有不同的移动速度而分离。聚丙烯酰胺电泳胶简称PAGE(Polyacrylamide gel electrophoresis)，以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质，利用分子筛效应分离蛋白质和寡核苷酸。电泳过程中的蛋白质迁移率与分子量、形状、电荷量均相关[2]。Shapiro于1967年提出SDS-PAGE(Sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis)法，可仅凭分子量不同分离蛋白质[3]。1970年，Laemmli完善了不连续电泳技术，用于分离大分子蛋白。不连续缓冲体系由电泳缓冲液、堆积胶、分离胶组成。蛋白质样品在堆积胶中经过大孔径凝胶的堆积效应被浓缩在一个狭窄的区带，形成相同的分离起点；蛋白质进入分离胶后，较小孔径凝胶的分子筛效应将它们分离开[4]。经过多年发展，SDS-PAGE具备了分辨率高、重复性较好、灵敏度高、上样量少等特点，成为广泛应用的蛋白质分离方法[2]。

目前实验室常用的Laemmli法配制的SDS-PAGE胶虽然优点突出，但存在保质期短、耐受电压较低、电泳时间长等问题。一些生命科学公司研发了预制胶产品，在保持Laemmli胶良好分离性能的基础上，缩短了电泳时间，延长了电泳胶的保质期。例如Bio-Rad公司的一种蛋白质凝胶适用电压为200～300 V，电泳时间在30 min左右，在2～8 ℃时保质期为12个月；EZBiolab的预制胶适用电压为150 V，电泳时间在40～50 min，4 ℃时可保存18个月。……