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辅助蛋白基因的剪接对磷脂酶A1酶活的影响

2021-03-31薛正莲甘玉飞

食品科学 2021年6期

杨 蒙,薛正莲,2,*,甘玉飞,周 杰,王 洲,2,刘 艳,2

(1.安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽 芜湖 241000;2.微生物发酵安徽省工程研究中心,安徽 芜湖 241000)

磷脂酶A1(phospholipase A1,PlaA1)在食品、医疗、纺织等行业用途十分广泛,其主要用途为植物的油脂脱胶[1]。PlaA1将植物粗油中存在的磷脂杂质进行酶解,生成游离脂肪酸和亲水性溶血磷脂,以提高后期油脂存储的稳定性[2]。目前,关于PlaA1的研究,主要集中于对其本身进行分子改造[3-7]和发酵工艺条件优化[8]以提高PlaA1的催化活性。Jae[9]、Fu Jianhong[10]和苏燕南[11]等从沙雷氏菌中发现编码PlaA1的基因下游存在一段与plaA1基因重叠5 bp的辅助蛋白基因plaS,该基因能编码蛋白质但无酶活性,将PlaA1与磷脂酶A1辅助蛋白(phospholipase A1 accessory protein,PlaS)共表达基因plaB克隆在大肠杆菌中发现,胞外会产生有活性的PlaA1,但是单独表达PlaA1时会产生大量没有PlaA1活性的包涵体,表明plaS对PlaA1的胞外表达具有调控作用。

对PlaS进行生物信息学分析发现,PlaS属于锚蛋白(Ankyrin,ANK)家族中的ANK2家族,根据GenBank(Protein-ID:AFN44705.1)数据分析,其蛋白结构是由N端、ANK区域和C端三部分区域组成,其中ANK区域包含4 个典型的ANK重复序列(ANK reapeat)。ANK是一种胞内连接蛋白,为单链多肽,通常由若干个ANK repeat串联而成,每一个ANK repeat包含30~33 个氨基酸,组成β2α2的“L”型结构[12],可以介导蛋白质与蛋白质之间的相互作用[13]。在许多生物体内的蛋白质中都发现了ANK repeat,其功能包括细胞信号转导[14]、维持细胞骨架的完整性、调节细胞周期[15-16]、炎症反应[17]、发育[18]和各种转运作用[19-21]等。这些ANK repeat模块通常形成一个由重复次数决定的形状大小不同的细长表面。一个孤立的ANK repeat是无法行使其功能的,它必须与另一个ANK repeat相连接,其编码的肽链才能产生正常的折叠[22]。……

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