刘 艳，谢 君，王 竹，李睿萍，孙万森△

1 西安交通大学第二附属医院，陕西 西安710004；2 西安市胸科医院

汪昂《医方集解》云：“肺为水之上源，肾为水之下源”，水通道蛋白（aquaporin-4，AQP4）与机体水液代谢密切相关。本研究观察AQP4在单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction，UUO）大鼠肺、肾组织的不同表达及祛风通络方的干预作用，探求肺、肾在水液代谢过程中的分子生物学基础，为祛风通络方的临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 动物与药品健康SPF 级雄性成年SD 大鼠40 只，体质量（200±20）g，由西安交通大学医学院动物实验中心提供，实验动物合格证号：SCXK（陕）2017-001；缬沙坦胶囊（代文，北京诺华制药有限公司，国药准字H20040217，规格：80 mg/片）；祛风通络方购于西安交通大学第二附属医院草药房，由黄芪、乌梢蛇、防风、海风藤、生地黄、桑寄生组成，每剂含生药130 g。

1.2 实验试剂兔抗大鼠一抗（美国Santa Cruz 公司，批号：sc-32739）；SP 试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司，批号：SP-9001）；Anti-Aquaporin 4 antibody（美国abcam 公司，批号：ab952）；Goat anti-Mouse IgG Secondary Antibody（批号：L3031）及Goat anti-Rabbit IgG Secondary Antibody（批 号：L3011）均 由Signalway antibody 公司提供；总RNA 极速抽提试剂盒（上海飞捷生物技术有限公司，批号：RNAfast200）；PrimeScript RT Master Mix（TaKaRa 公 司，批号：RR036A）；SYBR Premix Ex TaqTM Ⅱ（TaKaRa公司，批号：RR820A）。

1.3 动物分组及模型制备48 只大鼠适应性喂养1 周后按随机数字表法选出8 只作为空白组。剩余40只采用单侧输尿管结扎法［1］建立大鼠肾病模型，1 周后从造模大鼠中按随机数字表法抽取8只，腹腔注射10%水合氯醛（0.4 mL/100 g）麻醉，取大鼠肾脏组织HE 染色，若见大量肾小管萎缩，炎症细胞浸润，大量基质沉积，提示造模成功［2］。将造模成功32 只大鼠按随机数字表法分为模型组、缬沙坦组及祛风通络方大、小剂量组，每组8 只。术后第一天开始灌胃，祛风通络方大、小剂量组分别给予2、1 g/mL浓度药液2 mL，空白组、模型组灌服等体积生理盐水，每日1次，共20天。……