化痰散结方对人胃癌MKN45 细胞的体内外抑制作用∗
2021-03-31王华,郭维,2△,孙琪,2
王 华,郭 维,2△,孙 琪,2
1 宁夏医科大学中医学院,宁夏 银川750004;2 宁夏医科大学回医药现代化教育部重点实验室
胃癌是常见的消化道肿瘤,因其侵袭和转移致预后极差,死亡率高[1]。中医认为,痰浊与胃癌的发病关系密切。痰的特点是胶着难去,随气升降,无处不到[2-3],其特点与肿瘤的特性十分相似。《丹溪心法》曰:“凡人身,上中下有块者,多是痰。”充分说明痰与肿瘤的关系[4]。基于此,化痰法治疗肿瘤成为临床常用的大法,本课题组前期自拟化痰散结方治疗胃癌,取得较好疗效,现进一步探讨其作用机制。
1 材料与方法
1.1 细胞和动物MKN45 人胃癌细胞株(中国科学院上海生科院细胞资源中心);健康SD 雄性大鼠10 只,由宁夏医科大学实验动物中心提供,实验动物许可证号:SCXK90(宁)2015-0001;BALB/C裸鼠,均选用雄性裸鼠24 只,体质量(21±2)g,在宁夏医科大学动物中心SPF 条件下饲养,实验动物许可证号:SCXK(京)20160006。
1.2 药物化痰散结方药物组成:半夏15 g,天南星15 g,浙贝10 g,生牡蛎30 g,全蝎6 g,地龙6 g,守宫6 g,乌贼骨15 g,炙甘草6 g,木蝴蝶15 g,凤凰衣15 g,刺猬皮10 g,山甲粉3 g,蜈蚣6 g,藤梨根15 g,由宁夏医科大学附属回医中医医院制成浓度为1.56 g/mL 的水煎剂。注射用5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)由上海旭东海普药业有限公司生产。
1.3 试剂与仪器胎牛血清(gibco,批号:1739463);CCK-8 试剂(日本同仁化学,批号:LK815);胰蛋白酶(北京索莱宝生物有限公司,批号:T1302);PBS缓冲液(批号:AD20616267)、RPMI-1640 培养基(HyClon 公司,批号:AC10375291);OB 医用吻合胶(广州白云山医药集团股份有限公司,批号:160108)。恒温CO2培养箱HF-90(Thermo Scientific);倒置显微镜CKX31(OLYMPUS Corporation);连续波长及核酸蛋白微量检测酶标议(Tecan 瑞士)。
1.4 方法
1.4.1 细胞培养及分组将MNK45 胃癌细胞分别接种于T25的培养皿中,5%CO2、37℃培养箱中培养,待细胞生长成对数生长期进行实验。……
