程宇航，邱 静，鄢文静，张雨婷，汪怡萍，谭子虎

湖北中医药大学，湖北 武汉430065

阿尔茨海默病（alzheimer’s disease，AD）是一种以认知功能障碍为核心、伴有日常生活能力及社会功能损害为特点的神经退行性疾病，占痴呆总数的50%～70%，远高于其他类型痴呆［1］。目前AD 发病机制复杂，尚缺乏有效预防和治疗药物，积极寻求新的治疗方法显得尤为重要。本课题组以健脾补肾、祛瘀化痰为法拟定加减薯蓣丸，前期临床研究［2］发现其能提高轻、中度AD 患者简易智能量表、日常生活功能量表评分，因此有必要对加减薯蓣丸对AD 的作用机制进行深入研究，本研究应用APP/PS1 双转基因小鼠探讨加减薯蓣丸治疗AD的可能机制，为药物的临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物SPF 级5 月龄APP/PS1 雄性双转基因小鼠，购于南京大学模式动物研究所，实验动物合格证号：SCXK（苏）20180008，体质量（33.7±3.2）g。饲养于湖北省中医院SPF 级实验动物中心。温度（21±3）℃，相对湿度（60±5）%，自由饮食饮水，12 h明暗交替。

1.2 实验药物加减薯蓣丸浓缩剂（薯蓣健脾益智合剂，湖北省中医院制剂中心制备，鄂药制字Z20150027，批号：20190101）。药物组成：山药30 g，制何首乌24 g，熟地黄24g，党参20 g，麸炒白术18 g，茯苓18 g，白芍20 g，当归20 g，川芎10 g，杜仲15 g，炙远志12 g，石菖蒲14 g，枸杞子18 g，五味子10 g。加水煎煮3 次，每次1 h，过滤合并，经物理方法浓缩提纯，制成口服液，含生药1 g/mL，真空包装，250 mL/袋，4℃冷藏备用。

1.3 实验试剂和仪器RIPA 裂解液（批号：P0013B）、BCA蛋白浓度测定试剂盒购于碧云天（批号：P0010）；ECL 底物液（Thermo，批号：NCI5079）、兔多抗p-AMPKα1（thr172，批号：2535S）、兔多抗p-eEF2（thr56，批号：A00830-2）、兔多抗eEF2K（批号：A02277-1）购于武汉博士德生物工程有限公司；鼠单抗p-eEF2K（ser366，批号：3691S)购于santa cruz；……