李进丹，王 瑞，杨 军，罗玥媛，郭效宾，廖承德

(云南省肿瘤医院 昆明医科大学第三附属医院放射科，云南 昆明 650118)

胶质瘤是中枢神经系统(central nervous system, CNS)最常见恶性肿瘤，恶性程度及致死率均高。大脑血脑屏障(blood brain barrier, BBB)是临床治疗胶质瘤困难的主要原因。聚焦超声(focused ultrasound, FUS)与超声造影剂微泡(microbubbles, MB)相结合，可局部、无创地暂时开放BBB。近年来，以程序性死亡蛋白1(programmed cell death protein 1, PD-1)单克隆抗体(简称单抗)为代表的免疫治疗用于多种肿瘤展现出极大潜能。本研究通过动物实验观察FUS与PD-1单抗协同治疗胶质瘤的价值。

1 材料与方法

1.1 实验材料 50只6～8周龄雄性SD大鼠购于昆明医科大学实验动物中心[SCXK(滇)K2015-0002]，体质量80～100 g。C6细胞株购自昆明动物所，培养后经胰酶消化制成细胞悬液(细胞浓度约2～5×105个/ml)。本研究经昆明医科大学伦理委员会审核通过(批准号：kmmu2021006)。

1.2 测试FUS安全性及BBB开放 随机选取10只大鼠测试FUS安全性及BBB开放情况，见图1A。经尾静脉注射MB(六氟化硫微泡，声诺维©，上海博莱科信谊药业)0.2 ml/100 g体质量，以低功率聚焦超声实验装置(重庆融海超声医学工程研究中心有限公司，重庆)行FUS辐照，条件分别为4 W/200 s、4 W/150 s、4 W/250 s；之后经尾静脉注射伊文蓝(Evan blue, EB)0.2 ml/100 g体质量。

1.3 制作胶质瘤模型 将其余40只大鼠麻醉后俯卧保定于颅脑定位仪，暴露术区颅骨,于冠状缝前1 mm、矢状缝右3 mm，沿颅骨钻孔注射5 μl C6细胞悬液制成胶质瘤模型。

1.4 MR检查 采用Philips Ingenia 3.0T MR扫描仪，专用动物线圈(GC-MUC44-H300-AP，辰光医疗，上海)，于造模后第9天及第17天行头部扫描，采集T2WI、对比动态增强MRI(dynamic contrast enhanced MRI, DCE-MRI)及增强T1WI。由2名具有5年头部影像学诊断经验的主治医师观察病灶MRI表现，测量病灶体积，意见不一致时经讨论决定。……