张玲玲，崔嵩嵩

（哈尔滨元亨生物药业有限公司，黑龙江 哈尔滨 150025）

PCR 技术的出现最早是在上世纪80年代的美国，该技术可在检测特定DNA 的片段中发生微量扩增，从而完成检测的工作任务。应用在相关的领域，PCR 技术在灵敏度和特异性方面都比较好。随着相关技术水平的不断发展与创新，目前PCR 技术的应用范围在不断扩展，最初是应用在基因克隆方面，而今在兽医临床的治疗和诊断过程中都有充分的应用。所以针对PCR 技术开展更加深入的研究，在实现微生物精准检测方面具有重要意义。

1 PCR 技术的原理与应用特征

1.1 PCR 技术原理 将现有的技术作为基础，使各种DNA片段序列有效的进行扩增，加之人工合成DNA 片段的相互作用，即可在两条链的末端进行互补，凸显出核苷酸引物，基于此种方式的作用，受到酶的作用之后待检DNA 序列会发生扩增，称其为PCR 技术。通常PCRM 就是体外人工选择性扩增DNA 的方法，类似生物体内的DNA 的复制情况。在这整个反应过程中，DNA 模板会发生变性、退火以及延伸3 个过程，并且是由许多个循环序列而组成的。首先，受到高温的作用之后DNA 模板发生变性解链，之后会通过降温方式而促使寡核苷酸和模板DNA 链在三端都有退火的情况。此外受到聚合酶的作用，存在4 种dNTP 底物，同时会在模板互补的实际过程中而出现新的链条形成。除此之外，在单一的拷贝过程中，基因会将25～30 作为基数，最终能够将其扩展到100 万～200 万。扩增的后期会因为产物的积累，造成原来本是呈现指数扩增的反应转变为平坦的曲线，而且产物也不会再继续随着循环数而呈现出明显的上升趋势，实际应用中将其称为平台效应。……