卢厚新，杨清泉，郭 石

(1.南阳市中心医院 全科医学科，河南 南阳 473000;2.开封市儿童医院 药学部，河南 开封 475000)

缺血性心脏病(ischemic heart disease，IHD)是影响全世界人类生命健康的主要疾病之一[1]。低氧应激是IHD心肌细胞损伤的主要原因，其可通过促进细胞色素C从线粒体释放到细胞质，进而激活胱天蛋白酶级联反应，最终诱导心肌细胞凋亡[2]。心肌细胞凋亡是导致IHD的心脏功能障碍的主要原因之一[3]。因此，减少缺氧诱导的心肌细胞凋亡是预防和治疗IHD的重要策略之一。

传统中草药具有多种生物活性的天然化合物，其具有良好的治疗功效，且副作用极小，这为开发IHD药物提供了重要的来源[4]。槐果碱(sophoridine，Sop)是一种从豆科植物槐、刺槐和茎槐的茎和叶中分离出来的具有抗感染、抗病毒和抗癌等多种药理活性的喹唑烷类生物碱[5]。本研究主要探讨Sop对低氧引起的心肌细胞系H9c2损伤的影响并分析其机制，其将为进一步阐明Sop在IHD预防和治疗中的有益作用提供理论和实验依据。

1 材料与方法

1.1 细胞与实验试剂

大鼠心肌细胞系H9c2(myocardial cell line H9c2)和FITC-annexin V/PI细胞凋亡检测试剂盒(武汉普诺赛生命科技有限公司)；胎牛血清(Invitrogen公司)；DMEM培养基(Gibco公司)；青霉素、链霉素和槐果碱(Sop，HPLC纯度>98%)(Sigma-Aldrich公司)；MTT试剂盒、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)测定试剂盒、丙二醛(malonyldialdehyde，MDA)测定试剂盒和细胞裂解液(上海碧云天生物科技有限公司)；二喹啉甲酸法(bicinchoninic acid，BCA)蛋白定量试剂盒、增强化学发光(enhanced chemiluminescence，ECL)试剂盒和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)缀合的山羊抗兔IgG(H+L)二抗(广州赖德生物技术有限公司)；兔单克隆一抗cleaved-caspase-3、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT(Cell Signaling Technology公司)和β-actin(Abcam公司)。