章建伟 张涛 吴满武

中枢性性早熟（central precocious puberty，CPP）由于下丘脑-垂体-性腺轴（hypothalamus pituitary-gonad axis，HPGA）过早启动，发育年龄提前，骨骺提前闭合，将影响患儿的最终成年身高，给家长和患儿带来严重的心理影响和社会影响［1］。促性腺激素释放激素类似物（gonadotrophin releasing hormone analogue，GnRHa）能有效抑制HPGA 轴的活动、减缓骨龄进展、改善最终成年身高［2］。然而，临床上有相当部分患儿应用GnRHa治疗后出现生长减速，甚至生长停滞，最终成年期身高改善不理想［3-4］。目前临床上部分医生采用GnRHa 和重组人生长激素（Recombinant Human Growth Hormone，rhGH）联用治疗CPP 克服生长减速，但其确切机制尚未阐明［5-6］。本研究利用生长激素治疗GnRHag 干预后性早熟大鼠，观察软骨生长板变化，来探究联合应用rhGH 和GnRHa 治疗中枢性性早熟生长减速的机制。

1 材料与方法

1.1 动物分组及模型建立 48 只5 日龄的SFP 级雌性SD 大鼠由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，由浙江中医药大学动物实验研究中心大小鼠繁殖饲料（批号P1100-20200511006）饲养。随机分为8 组，每组各6 只。A：正常大鼠对照组，B：性早熟大鼠模型组，C：GnRHa 1000 μg/kg，D：GnRHa 800 μg/kg 给药组，E：GnRHa 600 μg/kg 给药组，F：rhGH+GnRHa 600 μg/kg 给药组，G：rhGH+GnRHa 800 μg/kg，H：rhGH+GnRHa 1000 μg/kg 给药组。模型组与给药组大鼠于5 日龄时皮下注射300 μg 达那唑溶液，溶解于25 μl 乙二醇/乙醇（1 ∶1）混合液。出生后25 天开始每天检查阴道开口情况，直至大鼠建立正常的性周期。给药组大鼠分别给予GnRHa 制剂曲普瑞林，2 周强化治疗1 次，4 周末时对联合给药组（FGH 组）大鼠加用rhGH 制剂［1 IU/（kg·d）］，8 周末时结束。

1.2 检测指标 （1）体征观察：自造模起每周用游标卡尺测量一次大鼠的体重、鼻尾长、胫骨长，连续8 周。大鼠胫骨组织切片观察大鼠胫骨样本置入4%多聚甲醛溶液中，24 h 后锯取0.5 cm 骨片，经过脱钙，脱水、石蜡包埋、冷冻切片，制成4 μm 石蜡切片，用于HE染色，通过显微镜拍照，观察和分析样本。……