刘晓娟，谢双双，张 晶，康燕华

河北北方学院附属第一医院妇产科，河北张家口 075002

尽管新的诊断技术和治疗方法不断被应用于临床，但是宫颈癌患者的预后仍然不令人满意。研究发现宫颈癌的转移和复发是引起宫颈癌患预后不佳的主要因素，p38MAPK由MAPK14基因编码，是引起宫颈癌进展、转移的重要蛋白[1]，但是其具体的调控机制尚不完全明确。最新研究证实了微小RNA(miRNA)与肿瘤发生和发展密切相关，miRNA可通过直接靶向靶基因的信使RNA(mRNA)诱导其讲解或转录抑制，从而转录后水平上调节基因的表达从而参与肿瘤的发展[2]。miR-3928是近年来新发现的与肿瘤相关的miRNA，有研究发现下调miR-3928的水平可以促进骨肉瘤的进展，提示miR-3928具有抑癌作用[3]，但是miR-3928在宫颈癌中的作用尚不清楚。此外，miRNA的靶向作用又被长链非编码RNA(LncRNA)的靶向调控，LncRNA会像“海绵”一样吸附miRNA从而调控靶基因的表达[4]。最新研究发现TTN-AS1可通过靶向miR-4677-3p促进ZEB1基因的表达，从而发挥促进肺腺癌细胞迁移和侵袭[5]。本研究主要分析RNA TTN-AS1通过miR-3928 调节p38MAPK参与宫颈癌进展的机制。

1 材料与方法

1.1材料 人宫颈癌细胞系CasKi(ATCC公司，美国)。DMEM培养基(Invitrogen公司，美国)。miR-3928类似物(mimic)、TTN-AS1和p38MAPK过表达质粒及相应的阴性对照(NC)(Thermo Fisher公司，美国)。Lipofectamine 2000(Invitrogen公司，美国)。双荧光素酶报告试剂盒和相应的荧光检测仪(Promega公司，美国)。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)试剂盒(Beyotime生物技术研究所，中国)。凋亡检测试剂盒和FACSCaliburTM流式细胞仪(BD Biosciencesg公司，美国)。Transwell小室和基质凝胶(BD Biosciences公司，美国)。PCR引物由Genewiz公司(中国)设计和合成。Trizol试剂(Invitrogen公司，美国)。逆转录cDNA试剂盒和SYBR Green PCR Master Mix qPCR试剂盒(Roche公司，瑞士)。……