胡安全，王正安，秦力，李哲，冯祁军

（嘉兴市第一医院 骨科，浙江 嘉兴314000）

坐骨神经损伤是一类临床上常见的神经损伤疾病，常与髋关节脱位、髋臼骨折等外伤并存，以车祸、工伤较为常见[1-2]。坐骨神经损伤恢复较慢，若治疗不当，可引起肢体瘫痪，造成患者严重残疾。骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMMSC）是一类源自骨髓基质的成体干细胞，具有自我复制能力和多向分化潜能[3-4]。大量研究表明，BMMSC能够诱导分化为神经元样细胞，对坐骨神经损伤具有一定的修复作用[4-5]。然而，绝大部分BMMSC在移植后迅速凋亡，不能充分发挥其修复功能。目前，提高BMMSC的治疗潜能是基础与临床研究的热点问题。

MicroRNA（miRNA）是一类广泛存在于真核生物体内的非编码RNA，具有多种生物学功能，在坐骨神经损伤的发病过程中发挥重要作用[6-7]。既往研究表明，转染microRNA-224（miR-224）可以提高移植后BMMSC 的存活能力，增强BMMSC 治疗卵巢早衰的效果[7]。然而，尚不清楚miR-224 转染能否增强BMMSC 对坐骨神经损伤的治疗作用。因此，本实验将过表达miR-224 的BMMSC 移植至大鼠坐骨神经，评估miR-224 联合BMMSC 对坐骨神经损伤的治疗作用，并探索相关机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物与材料

8～9 周龄SPF 级雄性Sprague Dawley（SD）大鼠购自北京华阜康生物技术有限公司。miR-224 慢病毒载体由山东维真生物科技有限公司构建，并进行鉴定。间充质干细胞培养基和DEME 培养基购自美国Gibco 公司，CD29、CD34、CD45 和CD90 抗体购自美国R&D 公司，凋亡检测试剂盒购自德国Roche公司，脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）、髓鞘碱性蛋白（myelinbasicprotein,MBP）、生长相关蛋白-43（growth associated protein,GAP-43）和甘油醛-3- 磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPDH）抗体购自美国Abcam 公司。……