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迟缓埃格特菌的MALDI-TOF MS和16S rRNA鉴定及生物学特征研究

2021-03-16李祥云王中新朱帮强潘亚萍周寅第胡媛媛宋国滨徐元宏

安徽医科大学学报 2021年2期

李祥云,王中新,朱帮强,潘亚萍,周寅第,胡媛媛,宋国滨,徐元宏

迟缓埃格特菌是一种专性厌氧革兰阳性杆菌,生长缓慢,5 d内可形成肉眼可见菌落,1935年科学家埃格特首次从人类粪便中分离出该菌,最初归类在厌氧杆菌属中,1999年完成测序后细分为埃格特属。该菌主要存在于消化道内,也是阑尾炎、肝脓肿和皮肤脓肿的病原菌,但原发疾病后进入血液,形成菌血症,却很罕见。血培养厌氧菌阳性在临床以脆弱拟杆菌和艰难梭状芽孢杆菌多见,迟缓埃格特菌阳性的菌血症较为少见,2014年韩国才报道该国首例迟缓埃格特菌引起的菌血症。安徽医科大学第一附属医院近3年的血培养厌氧阳性菌中,仅有2例此菌的鉴定。另外,迟缓埃格特菌导致的菌血症病死率较高,达到22%~43%,应引起足够的重视。该文对2例血培养阳性标本进行细菌培养和分离,进行迟缓埃格特菌的鉴定和药敏研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源 安徽医科大学第一附属医院检验科2020年1月和4月血厌氧培养阳性鉴定出的两株迟缓埃格特菌。

1.1.2 试剂与仪器 琼脂粉(江门市凯林贸易有限公司),基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-offlight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)质谱仪(法国生物梅里埃公司),引物(合成)购自上海生工生物公司,DNA marker和Premix Taq Ⅲ(日本TaKaRa公司),Vitek MSCHCA基质液(法国生物梅里埃公司),PCR仪(ABI9700型),紫外线凝胶成像系统(美国Bio-Rad公司)。

1.2 方法

1.2.1 常规细菌培养 当天报告阳性的厌氧血培养瓶,取1滴接种于血平板、麦康凯平板和巧克力平板上,加入厌氧包在37℃和5% CO箱厌氧培养72 h后,取菌落进行革兰染色镜检,触酶实验。……

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