冯云利，陈 惠，陈正启，郑慧华，方 媛，华 蓉，郭 相，孙达锋**

（1.农业农村部食用菌加工重点实验室，江苏 南京 210023；2.中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所，云南 昆明 650221）

多头霉属（Polycephalomyces），属于子囊菌门（Ascomycota）粪壳菌纲（Sordariomycetes）肉座菌目（Hypocreales）线虫草科 （Ophiocordycipitaceae）[1]。多头霉孢梗束初白色，老时为棕色，顶端有黄色粘液分生孢子团，分生孢子小，产孢瓶体末端瓶梗锥形或逐渐变细[1-3]。该属真菌寄主众多，可寄生于膜翅目、鱗翅目、脉翅目、半翅目等昆虫，以及重寄生于其他虫生真菌、黏菌、大团囊菌等[4-5]。

对采自云南省嵩明县梁王山的高原线虫草子实体基部的白色菌丝体进行分离培养，并通过菌丝体的形态学观察与ITS序列分析确定其分类地位。此次研究对了解和保护物种多样性及开发和利用虫草生物资源具有重要的理论意义，也为虫生真菌重寄生菌的研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试子实体

2015年7月于云南省嵩明县梁王山采集高原线虫草（Ophiocordyceps highlandensis）子实体，子实体标本保藏于中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所标本馆，编号为KEFI-08742。

1.1.2 培养基

1）PDA综合培养基

马铃薯200 g、蛋白胨1 g、酵母粉1 g、葡萄糖20 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、KH2PO41 g、琼脂 15 g，水1 000 mL，pH自然。

2）液体培养基

葡萄糖 5 g、蛋白胨 15 g、KH2PO41.5 g、MgSO40.75 g，加水至1 000 mL，pH 自然。

2）固体培养基

配方A：每瓶大米45 g；配方B：每瓶小麦45 g；配方C：每瓶大米22.5 g和小麦22.5 g。各配方添加液体培养基 58.5 mL（料液比为 1∶1.3）。

1.2 试验方法

1.2.1 重寄生菌的分离纯化

用无菌接种针刮取高原线虫草子实体基部白色菌丝，划线于含青霉素的PDA试管，25℃培养，经过多次纯化后得到纯培养菌株，编号JZ025。

牛血清白蛋白(上海市源聚生物科技有限公司)；……