结核性与恶性胸腔积液中微小核糖核酸内参基因筛选的初步研究
2021-03-11董静贾红彦孙琦李自慧魏荣荣杜博平邢爱英潘丽萍张宗德
董静 贾红彦 孙琦 李自慧 魏荣荣 杜博平 邢爱英 潘丽萍 张宗德
结核性胸膜炎是病理性胸腔积液形成的主要原因之一[1]。由于其临床表现不典型,需病原学检测来确诊。但目前胸腔积液的多种病原学检测方法的临床应用均不理想,如分枝杆菌抗酸染色和BACTEC MGIT 960快速液体培养的阳性率均较低,仅为10%和20%左右;γ干扰素释放试验难以区分结核分枝杆菌潜伏感染,特异度较低[2];穿刺活检和胸腔镜活检病理学检查虽可使阳性率提升至56%以上,但患者难以耐受侵入式检查,并发症较多,对医生操作水平和设备的要求也较高[3];而新一代实时荧光定量核酸扩增检测(GeneXpert MTB/RIF Ultra)技术也对30%~50%的疑似患者无法确诊[4-6]。临床亟需有效的新型检测方法。
微小核糖核酸(miRNA)是一类长度为19~25个核苷酸的非编码单链RNA分子[7-8],主要通过3′UTR区完全或不完全互补配对,结合相应靶mRNA 来抑制相应蛋白质的翻译[9]。相对于蛋白和长链RNA,miRNA具有抗酸、抗碱、抗核糖核酸酶,反复冻融不易降解的稳定性质[10],且已被大量研究证实,miRNA的动态变化与疾病的发生发展和转归有着十分密切的关系[1, 11-12]。但胸腔积液中miRNA含量较少、丰度偏低、缺乏公认的可相对定量检测的内参基因,阻碍了对胸腔积液中miRNA的相关研究[1]。为评估胸腔积液中miRNA内参基因定量检测的可行性,本研究选取了7个应用频次较高的定量检测胸腔积液及其他体液中miRNA表达量的内参基因,通过geNorm、NormFinder和BestKeeper软件分析并了解其在胸腔积液标本中定量检测的稳定性和表达丰度,为后期研究胸腔积液miRNA的动态变化与疾病的发生发展和转归关系提供基础支撑。……
