赵志煌 洪 洁 陈豪燕 钟 鸣

上海交通大学医学院附属仁济医院普外科1(200127) 消化内科2

结直肠癌(colorectal cancer, CRC)是一种常见的消化道恶性肿瘤，据最新全球癌症估算数据，2020年全球约有193万例新发CRC病例和93万例CRC相关死亡病例，分居全球癌症发病和死因的第三位(10.0%)和第二位(9.4%)[1]。我国CRC总体发病率和死亡率在恶性肿瘤中分居第三和第五位，且呈逐年上升趋势[2-3]。目前，CRC相关死亡的主要原因仍为肿瘤转移，因转移死亡的人数分别占初诊和确诊人数的25%和50%[4-6]。对于CRC转移患者，手术切除仍为最佳治疗方案，但术后复发现象常见[7]。因此，对CRC转移机制及其早期诊断分子标志物的研究显得尤为重要。

Fibulin蛋白家族是一类广泛表达于各类组织的细胞外基质(extracellular matrix, ECM)蛋白，其表达改变在肿瘤进展，尤其是侵袭、转移过程中发挥重要作用[8-12]，但具体作用机制尚未完全明确。本课题组的前期筛选研究发现，ECM功能在转移性CRC中有高度富集，同样提示了ECM在肿瘤转移中的重要作用。同时，本课题组还发现，fibulin-2(FBLN2)高表达的CRC患者无病生存期(disease free survival, DFS)较FBLN2低表达者明显缩短。基于FBLN2可能参与CRC侵袭、转移的假设，本研究分析了FBLN2在CRC中的表达情况，并探讨其对CRC侵袭、转移能力的影响和可能的作用机制，以期为CRC转移的早期诊断和治疗提供新靶点。

材料与方法

一、细胞株和主要试剂

人CRC细胞株HCT116、HT29、RKO、DLD-1、SW480、SW1116、LOVO、SW620以及人正常结直肠黏膜细胞株FHC均购自美国模式菌种收集中心(ATCC)细胞库。

DharmaFECTTM转染试剂(GE Healthcare)；FBLN2 siRNA和对照siRNA(siRNA-ctrl)序列见表1(上海吉玛制药技术有限公司)；FBLN2过表达质粒FBLN2-pcDNA3.1和对照质粒ctrl-pcDNA3.1(吉凯基因)；……