印辰宇,季爱平,季海明,刘艺春,杨海峰

(1江苏省泰兴市人民医院神经外科,泰兴 225400;2华中科技大学附属同济医院神经外科;*通讯作者,E-mail:hfwhstongji2016@126.com)

颅内动脉瘤主要发生在颅内动脉分叉部位,是动脉血管壁由于血管平滑肌细胞凋亡引起的瘤样凸起[1,2]。动脉瘤破裂是蛛网膜下腔出血的主要病因,患者死亡率较高且预后较差[3,4]。探究动脉瘤的发生和发展机制,对预防和治疗动脉瘤至关重要。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的无编码功能的单链RNA,近年来动脉瘤的分子研究发现lncRNA与动脉瘤的发病密切相关[5]。lncRNA通过调节基因表达,影响血管平滑肌细胞的功能,介导动脉瘤的发生和发展[6]。同时,血清中特异性表达的lncRNA可作为动脉瘤形成的分子标志物[7]。LINC01359为lncRNA之一,存在于人血清中,可能成为肝癌非侵袭的标志物[8]。然而,LINC01359与动脉瘤的关系尚不清楚。本研究旨在分析LINC01359在动脉瘤患者血清中的表达水平,探究LINC01359对血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响及可能的分子调节机制。

1 材料和方法

1.1 细胞株和试剂

人血管平滑肌细胞(HVSMC)购自中国科学院生物化学与细胞生物学研究所。含有si-LINC01359序列的人重组慢病毒载体MCS-CMV-si、空载病毒MCS-CMV、LINC01359野生型及突变型重组双荧光素酶报告载体(LINC01359-WT、LINC01359-Mut)、miR-504-5p模拟物及对照物,购自上海吉凯生物技术有限公司。DMEM培养基、胎牛血清购自美国GIBOCO公司。双荧光素酶报告基因检测试剂盒和MTS试剂盒购自美国Promega公司。实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)试剂盒购于日本Takara公司。Annexin Ⅴ/7-AAD双染法检测试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司。……