徐 慧，董昌武

原发性高血压(essential hypertension，EH)是临床常见的心血管疾病，以体循环动脉压升高为主要病症，病人长期处于高血压状态会引起心、脑、肾等靶器官的严重并发症[1]。据报告，我国有1/3～1/2的心血管性死亡归结于高血压。如果血压得不到有效控制，病人心血管事件风险将增加74%[2]。高血压中最常见的中医证型是肝阳上亢证[3]，一般而言，实则肝阳上亢，治以平肝潜阳，而天麻钩藤饮即是平肝潜阳法经典的代表方剂。天麻钩藤饮可以降低血压，改善高血压引起的眩晕、头痛等症状，还可以对高血压脑出血病人起到神经保护作用等[4-5]。另外，通过针刺自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats，SHR)的耳甲、曲池穴，也可以显著降低大鼠的血压，尤以耳甲穴最为明显[6]。但是，目前关于天麻钩藤饮联合针刺治疗高血压的研究较少，且限于临床研究，有关其机制探讨文献报道较少。本研究拟观察两者联合对SHR大鼠的降压作用，并初步探讨其可能存在的机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 SHR大鼠40只，雄性，12周龄，体质量(230±10)g，购自北京维通利华动物技术有限公司，生产许可证号：SCXK(京)2016-0006。实验方案经实验动物医学伦理学委员会审核通过。

1.2 主要仪器和试剂 小动物无创血压测定仪(美国Kent公司生产，RZ-CODA)；电子天平(德国sartorius公司生产，BSA224S)； 冷冻离心机(美国Sigma公司生产，2-16PK)；神经肽Y(Neuropeptide Y，NPY)大鼠酶联免疫试剂盒(美国Cell Signaling Technologies公司生产，批号：11976)；内皮素-1(endothelin-1，ET-1)大鼠酶联免疫试剂盒(Santa Cruz公司生产，批号：sc-45061)。天麻钩藤饮组成：天麻9 g，钩藤12 g(后下)，石决明18 g(先煎)，山栀9 g，黄芩9 g，川牛膝12 g，杜仲9 g，益母草9 g，桑寄生9 g，夜交藤9 g，茯苓9 g，购自安徽中医药大学第一附属医院。

1.3 方法

1.3.1 实验分组 使用随机数字表法将40只SHR随机分为4组：针刺组、天麻钩藤饮组、针刺+天麻钩藤饮组、模型组，每组10只。

1.3.2 干预方法 针刺组：针刺大鼠双侧耳甲穴(大鼠耳甲区，穿透至耳背的“降压沟”位置)、足三里穴(后肢胫骨粗隆下方约5 mm处)、曲池穴(屈肘，肱骨外上髁内侧凹陷处)，垂直插入，顺时针均匀提插捻转，平补平泻手法30 s，逆时针捻转提出。针刺治疗每日1次，疗程为4周。天麻钩藤饮组：天麻钩藤饮制备后，按照10.26 g/kg剂量给药，按1 mL/100 g大鼠(含生药1 g/mL)的灌胃剂量，予水煎液灌胃，每日1次，连续4周。按照等量不等浓度的原则，不同组每只大鼠依其体质量确定其灌胃。针刺+天麻钩藤饮组：实施针刺和灌胃天麻钩藤饮两种方法联合使用。模型组：与另外3组体质量、周龄相同的大鼠，于相同环境和相同饲养方式下喂养致4周实验结束时，检测相同指标，作为对照。

1.4 实验指标测定

1.4.1 血压检测 大鼠37 ℃预热，10～15 min后用小动物无创血压测定仪测量大鼠清醒状态下尾动脉收缩压，测量3次，取其平均值作为该样本的收缩压，分别于治疗前、治疗2周和治疗4周时进行测定。

1.4.2 血清NPY、ET-1含量测定 将大鼠使用戊巴比妥钠腹腔麻醉后，腹主动脉取血，取血后，将4 mL全血转移至离心管中，4 ℃、3 000 r/min离心10 min，分离上清液，置于-20 ℃冰箱保存待测。通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法定量测定血清中NPY和ET-1的含量，检测方法严格按照试剂盒说明书的操作步骤进行。

2 结 果

2.1 各组大鼠血压比较 治疗前各组大鼠血压比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗2周时天麻钩藤饮组、针刺+天麻钩藤饮组血压较治疗前下降，差异均有统计学意义(P<0.05)；治疗2周时针刺组血压与治疗前比较，差异无统计学意义(P>0.05)；治疗4周时针刺组、天麻钩藤饮组和针刺+天麻钩藤饮组血压较治疗前均下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗2周时，天麻钩藤饮组和针刺+天麻钩藤饮组血压均较模型组下降明显，差异均有统计学意义(P<0.05)；针刺组血压与模型组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；针刺+天麻钩藤饮组血压较针刺组和天麻钩藤饮组下降明显，差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗4周时，针刺组、天麻钩藤饮组和针刺+天麻钩藤饮组血压较模型组下降明显，差异均有统计学意义(P<0.05)；天麻钩藤饮组较针刺组血压下降明显，差异有统计学意义(P<0.05)；针刺+天麻钩藤饮组血压较针刺组和天麻钩藤饮组下降明显，差异均有统计学意义(P<0.05)。详见表1。

表1 各组大鼠血压比较 (±s) 单位：mmHg

2.2 各组大鼠血浆NPY和ET-1水平比较 针刺组、天麻钩藤饮组和针刺+天麻钩藤饮组NPY水平较模型组降低，差异均有统计学意义(P<0.05)；天麻钩藤饮组NPY水平低于针刺组，差异有统计学意义(P<0.05)；针刺+天麻钩藤饮组NPY水平低于针刺组、天麻钩藤饮组，差异均有统计学意义(P<0.05)。天麻钩藤饮组和针刺+天麻钩藤饮组ET-1水平低于模型组，差异有统计学意义(P<0.05)；针刺组ET-1水平与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)；天麻钩藤饮组ET-1水平低于针刺组，差异有统计学意义(P<0.05)；针刺+天麻钩藤饮组ET-1水平低于针刺组和天麻钩藤饮组，差异均有统计学意义(P<0.05)。详见表2。

表2 各组大鼠血浆NPY、ET-1水平比较 (±s) 单位：pmol/L

3 讨 论

高血压在中医学中可归于“眩晕”“头痛”范畴。天麻钩藤饮出自《中医内科杂病证治新义》，是治疗肝阳上亢型高血压的代表方剂，全方组合有补有泻，上能平肝清热，下能补肾活血，方中天麻、钩藤等也具有直接降压的作用。经络辨证分析，高血压病多属阳明经证、厥阴经证，通过调节阴阳、疏经通络可达到降压目的。针刺可通过抑制交感神经活动、调控炎症及免疫反应、调节肾素-血管紧张素-醛固酮系统等来发挥降压作用[7]。本研究结果表明，天麻钩藤饮和针刺均可以降低SHR的血压水平，两者联合应用降压效果更加显著。该两种中医治疗方法联合应用相比于西药，具有不良反应较少、无明显的药物依赖性等优势。两者联合应用时降压效果更加明显，考虑两者同时使用可能存在一定的协同作用。

本研究结果显示，天麻钩藤饮和针刺在降低血压的同时降低了大鼠NPY和ET-1的水平，两者联合应用时NPY和ET-1的降低更加明显。NPY是一种高效缩血管物质，可直接作用于血管平滑肌细胞使血管收缩，对小动脉有强烈收缩作用，并可加强其他缩血管物质(如去甲肾上腺素等)的缩血管作用[8]，进而引起血压增高。ET-1也是一种强效的内皮源性血管收缩剂，可以强烈地促进细胞增殖的启动及推动因子，可使血管平滑肌增生肥厚，促进血管壁的增生和狭窄，进而导致血压增高[9-10]。

已有研究表明，通过针刺SHR大鼠的耳甲区，可以降低大鼠平均动脉血压和心率，抑制交感神经活性[11]。当交感神经兴奋后可通过节后神经纤维释放神经递质使NPY释放增加，进而引起血管收缩的效应[12]。ET-1在交感神经系统中的调控不仅是通过局部神经递质的释放，而且与神经元的活动有关[13]。提示如果抑制交感神经的兴奋性可使血清中NPY和ET-1的含量减少。天麻钩藤饮能够显著降低高血压病人的血压，可能是通过降低NPY和ET-1而发挥作用[14-15]。因此，两者联合应用时降压效果更加显著，可能是因为在降低体内NPY和ET-1的水平中产生了协同作用。

治疗2周时针刺组血压及ET-1水平与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗4周时血压及NPY水平与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)，提示针刺降压达到一定效果需要时间的累积，NPY的变化在针刺降压中起着更加重要的作用。单独运用针刺治疗时ET-1水平的变化不明显，但是针刺联合天麻钩藤饮比单独运用天麻钩藤饮时ET-1水平下降更明显，这也说明两者之间存在协同作用。

综上所述，天麻钩藤饮联合针刺治疗原发性高血压具有协同效应，降压效果显著，其降压机制与降低血清NPY和ET-1水平有关，交感神经兴奋性的改变可能参与了这一过程的调节。但是高血压的病变涉及多器官、多系统的损害，血压的调节也是一个复杂的过程，所以在后续的实验中，有关天麻钩藤饮联合针刺对于靶器官的保护作用以及血压调节与交感神经的联系等，仍是需要进一步研究的方向。