高压氧促进小鼠脊髓损伤后功能恢复
2021-02-05廖小俊陈亚星文泽贤
廖小俊 李 兰 陈亚星 文泽贤
脊髓损伤包括原发性和继发性损伤,原发性损伤不可逆,治疗重点在继发性损伤[1]。高压氧治疗(hyperbaric oxygen,HBO)可减少脊髓损伤后继发性损伤[2],机制主要有减轻炎症反应、抑制神经元凋亡、减轻脊髓水肿、促进血管再生、促进轴突再生等[3]。Nrf2具有神经保护作用,是否参与HBO 治疗脊髓损伤的机制,目前尚不清楚。本研究拟采用小鼠脊髓损伤模型,分析HBO治疗对小鼠脊髓损伤后Nrf2的影响,进一步探讨HBO治疗脊髓损伤的机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物及分组45 只成年雌性ICR 小鼠[购于北京华阜康生物科技股份有限公司,体质量(24±2)g]按随机数字表法分为3 组假手术组(A 组,n=15)、模型组(B组,n=15)、HBO组(C组,n=15)。
1.2 动物模型建立 腹腔注射4%水合氯醛(10 ml/kg)麻醉小鼠,以T11 棘突为中心,在背部正中做长约2 cm切口,依次切开皮肤、皮下组织,切开椎旁肌向两侧分离,显露T9~L1 椎体棘突及椎板。小鼠左侧第13肋骨脊柱发出部位为T12与L1交界处,以此判定T11脊椎位置。咬除T11椎体棘突及背侧椎板,血管夹从左右两侧将T11节段脊髓压迫至0.2 mm[4],持续15 s,保持脊膜完整,止血、缝合各层组织。假手术组只打开椎板,不损伤脊膜及脊髓。术后置于暖光灯下复苏,苏醒后BMS 评分0 分判断为建模成功。术后分笼饲养,每天挤压膀胱协助排尿2次。
1.3 HBO 治疗方法及管理 将HBO 组小鼠置于动物实验高压氧仓,加压10 min 使仓内压力达到0.2 Mpa,仓内氧浓度达到95%以上,稳压吸氧40 min[5],每日1次,共7 d。造模后护理:每日按压膀胱排尿2次,间隔12 h,直至小鼠排便功能基本恢复。
1.4 小鼠后肢运动功能评分 造模后1、7、28 d 采用BMS 评分法[6]评估小鼠后肢运动功能恢复情况,每组5只。……
