孙 静 杨雪辉 葛春燕

髓母细胞瘤约占儿童中枢神经系统肿瘤的15%～20%，致残率、病死率较高，预后差[1，2]。近年来，随着神经外科技术的发展，髓母细胞瘤的致残率和病死率有下降趋势，5年生存率在50%～70%，10年生存率在30%～50%[3]。血栓素结合蛋白（thrombospondin，TSP）是多功能基质细胞糖蛋白，能够调节血管生成、炎症、细胞增殖和凋亡[4]。有研究显示TSP2 在髓母细胞瘤细胞中低表达，可能通过激活Notch信号通路促进肿瘤细胞侵袭、迁移和血管生成[5]。本文探讨人髓母细胞瘤组织TSP2的表达水平及其与病人预后的关系。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选取2007 年6 月～2014 年10 月手术切除的髓母细胞瘤组织110 例，其中男69 例，女41例；年龄3～41 岁，平均（13.03±2.60）岁。根据WHO（2016）中枢神经系统肿瘤分类[6]：经典型71例，结节型/促结缔组织增生型30 例，大细胞型/间变型9 例；WNT 亚型24 例，SHH 亚型27 例，非WNT/SHH 亚型59 例。所有病人术前均未接受放、化疗或免疫治疗。另选取40 例颅脑损伤内减压术中切取的正常脑组织为对照，其中男26 例，女14 例；年龄17～34岁，平均（23.56±6.90）岁。

表1 110例髓母细胞瘤病人生存预后影响因素的Cox比例回归风险模型分析结果

1.2 免疫组织化学染色法检测TSP2 表达 所有组织均经过10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，4 μm连续切片。按照免疫组化试剂盒（上海雅吉生物科技有限公司）说明书进行操作，切片脱蜡后用磷酸盐缓冲液冲洗3 次。用0.01 mol/L 柠檬酸钠缓冲液高温高压下进行抗原修复，3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶10 min。磷酸盐缓冲液洗涤3 次后滴加兔抗人TSP2单克隆抗体（1:500，美国Sigma公司），4 ℃孵育过夜，滴加二抗。链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法显色，苏木精复染。……