王睿健 张文超 尹 涛

胶质母细胞瘤（glioblastoma multiforme，GBM）属于WHO分级Ⅳ级胶质瘤，是成人中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤，病死率和复发率较高[1]。寻找潜在的生物学标志物对GBM 早期诊治有重要意义。肿瘤高表达细胞周期相关蛋白（cell cyclerelated and expression elevated protein in tumor，CREPT）编码基因位于人类20 号染色体长臂1 区1带，包含7 个外显子，在非小细胞肺癌[2]、结直肠癌[3]和宫颈癌[4]、肾癌[5]等多种肿瘤中高表达，与肿瘤的发生和发展密切相关。本文探讨人脑GBM 组织CREPT的表达水平及其与病人预后的关系。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选取2010 年1 月至2011 年1 月我院病理科保存的104 例GBM 组织，术前均未接受过放化疗，其中男58 例，女46 例；年龄18～74 岁，平均（49.98±12.12）岁。选取2018 年1～12 月颅脑损伤内减压术中切除的正常脑组织40例为对照，其中男22例，女18 例；年龄32～61 岁，平均（50.02±11.18）岁。两组年龄、性别无统计学差异（P＞0.05）。

1.2 免疫组织化学染色法检测CREPT 的表达 石蜡切片厚度4 μm。SP 免疫组化试剂盒购于北京博奥森生物技术有限公司，严格按照试剂盒说明书进行操作。经二甲苯脱蜡、梯度酒精水化、枸橼酸溶液抗原修复后，聚乙二醇辛基苯基醚通透，用3%过氧化氢溶液灭活内源性过氧化物酶，随后用山羊血清封闭。滴加鼠抗人CREPT 单克隆抗体（1:500，上海远慕生物科技有限公司），湿盒内孵育过夜。用SP 法显色，苏木精复染。梯度酒精脱水，二甲苯溶液透明，中性树胶封片，BX43 型显微镜观察。每张切片观察5个视野，每个高倍镜至少观察100个细胞。染色强度评分：0 分为无着色；1 分为浅棕色；2 分为中棕色；3 分为深棕色。染色细胞百分比评分：1%～25%为1分；……