microRNA-873在子宫内膜癌中的表达及对肿瘤细胞增殖和侵袭的影响
2021-01-29黄锦刘佳淑刘胜凤敬巧刘玉娟
黄锦,刘佳淑,刘胜凤,敬巧,刘玉娟
(川北医学院附属医院妇产科,四川南充 637000)
子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)是女性生殖道中常见的恶性肿瘤之一。早期患者的5年生存率超过90%,而晚期以侵袭性转移的发生和高复发率为特征,因此晚期子宫内膜癌患者的5年生存率降至20%以下[1-2]。近年来研究表明,微小RNA(microRNA)与肿瘤发生关系密切,可参与肿瘤的发生及发展过程中,故而有望成为肿瘤诊断和治疗的新型标志物[3]。miR-873作为一类微小RNA,在食管癌和肝癌中均有不同程度的异常表达[4-5],但其在子宫内膜癌中作用机制的研究报道少见。因此,本研究旨在探讨miR-873在子宫内膜癌组织中的表达及对人子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖和侵袭的影响,从而为子宫内膜癌的诊断和治疗提供新的靶点。
1 材料
1.1标本来源 收集2016年1月至2020年1月于川北医学院附属医院就诊的88例子宫内膜癌患者手术切除的子宫内膜癌组织,患者年龄(49.7±10.0)岁。纳入标准[6]:经病理检查证实为子宫内膜癌;术前未接受化疗及放疗。排除标准:合并其他恶性肿瘤患者。临床资料中肌层浸润深度:≥1/2肌层22例,<1/2肌层66例;伴淋巴结转移18例,其中累及淋巴管15例;国际妇产科联盟(FIGO)分期:Ⅰ~Ⅱ期66例,Ⅲ~Ⅳ期22例;组织学类型:Ⅰ型78例,Ⅱ型10例;分化程度:低分化34例,中高分化54例。另收集同期因子宫肌瘤行子宫切除术的60例患者正常子宫内膜组织作为对照组,患者年龄(50.6±9.8)岁。两组年龄差异无统计学意义(t=0.566,P>0.05),具有可比性。本研究经川北医学院附属医院医学伦理学委员会批准(No.2015ER117-1),患者及家属知情同意。
1.2细胞系、主要试剂及仪器 人子宫内膜癌细胞系Ishikawa(武汉博士德公司)。DMEM、胎牛血清、DMSO、100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素、胰蛋白酶(美国Gibco公司),miRNA提取试剂盒、miRNA荧光定量PCR检测试剂盒、miRNA cDNA合成试剂盒(大连宝生物公司),MTT试剂(上海东仁化学科技公司),结晶紫(美国Sigma公司),Matrigel(美国BD公司),细胞转染试剂Lipofectamine 2000(美国Epitomics公司),miR-873模拟物(miR-873 mimic)及模拟物阴性对照(miR negative control,miR-NC,广州市锐博公司)。……
