何冠涛, 方成乔, 罗旭娜, 苏金龙, 饶 雨, 林汉森

(广东药科大学 药学院，广东 广州 510006)

光亲和标记(photo-affinity labeling, PAL)自1962年首次报道以来[1]，迅速成为了药物与靶蛋白研究之间的重要桥梁，不仅可以指导先导物的筛选，更能够实现高效灵敏的药物受体识别[2]。PAL探针是目标化合物链接光反应性基团(photo-reactive group)以及报告基团(reporter group)的衍生物[3]，其中双吖丙啶类PAL探针的合成及其靶标识别研究已有许多相关报道[4-7]。基于PAL探针的设计原则[8]，李正球等[9-10]报道了一种具有简约结构特点的端炔基双吖丙啶类PAL的合成(Scheme 1)，同时证明了此类PAL探针具有良好的靶标识别性能，目前国内外已有各种靶蛋白研究采用此方法来合成PAL探针[11-16]。

Scheme 1

Scheme 2

在研究该中间体3-氧代-6-庚炔酸酯的合成方法时，发现上述制备方法略有不足：一方面，使用二异丙基氨基锂(LDA)直接与原料中的γ-H作用形成γ碳负离子，然而LDA的使用条件苛刻，反应需要在极低温(-78 ℃)、无水、无氧和氮气保护下进行，且后处理复杂，对仪器设备要求较高。另一方面，乙酰乙酸乙酯具有更加活泼的α-H，可与LDA作用形成α碳负离子，因此上述方法在原料与溴丙炔的亲核取代中，往往会生成大量的α-取代物和α,γ-二取代物，而γ-取代物3-氧代-6-庚炔酸乙酯的实际收率仅有5%～15%，且重现性较差，难以达到预定的效果。为此，改进了3-氧代-6-庚炔酸酯的合成工艺(Scheme 2)：利用二异丙胺氨解乙酰乙酸乙酯生成N,N-二异丙基乙酰基乙酰胺1，减弱α-H酸性，增大α-位空间位阻。之后再与3-溴丙炔进行亲核取代，经硅胶柱层析分离得到α-取代物2与γ-取代物3，两者比例为1/9，反应的区域选择性以及γ-位目标取代物的收率均有所提高。……