王 瑾 王加强 邱 洪 杨丽萍 李 佳 谭 翔

(四川省医学科学院，四川省人民医院检验科，成都 610072)

免疫球蛋白A肾病(immunoglobulin A nephropathy，IgAN)是一种自身免疫疾病，由IgA1异常糖基化形成半乳糖缺陷型IgA1并被正常IgG和IgA1作用诱发，形成的免疫复合物积累会引起诸如补体激活、氧化应激、炎症级联以及细胞凋亡等一系列反应[1，2]。该病在亚洲太平洋区域的发生率较高，且发展成终末期肾病的风险也高于其他地区[3，4]。现今对IgAN病理机制的研究尚未明确，通过加深对其发病机制的理解，对于开发新的特效治疗药物具有重要意义。miRNA是一类小分子非编码RNA，具有通过结合目标mRNA 3′UTR区域沉默基因的能力[5]。miRNA参与多种肾病的病理生理过程，也有文献报道了miRNA对IgAN的调控作用[6，7]。在包括IgAN在内的诸多文献中报道了miR-223对肾脏疾病的缓解作用，然而其具体机制尚不明确[8-10]。本研究通过建立IgAN的HK2细胞和大鼠模型，并以miR-223 mimics或agomir处理，探究miR-223在IgAN中的作用机制。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1细胞来源 人肾小管上皮细胞HK2和人肾小管系膜细胞HMC购自中科院上海细胞库。

1.1.2实验动物 40只SPF级SD雄性大鼠，体质量220～250 g，购自上海斯莱克实验动物有限公司，于室温、40%相对湿度的环境条件下喂养14 d，期间昼夜12 h交替，水和饲料正常供给。

1.1.3主要试剂 DMEM细胞培养液、胎牛血清购自美国Gibco公司；Lipofectamine 2000转染试剂购自美国Invitrogen公司；牛血清白蛋白、脂多糖购自美国Sigma公司；尿蛋白、尿素氮(urea nitrogen，BUN)、血清肌酸酐(serum creatinine，SCr)、IL-1β、IL-18检测试剂盒购自南京建成生物工程有限公司；反转录试剂盒SsoFastTMEva-Green®Supermix购自美国Bio-Rad公司；荧光素酶报告系统购自美国Promega公司；……