焦 磊,宫熳钰,张 莹

(哈尔滨医科大学药学院药理学教研室,黑龙江 哈尔滨 150000)

长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一类转录本长度大于200 bp、不具有编码成熟蛋白质能力的RNA分子[1]。近年来，大量研究显示[2-3],lncRNA参与肿瘤、糖尿病、心血管疾病等多种疾病的发生发展中。锌脂蛋白编码基因Znfx1(zinc finger，NFX1-type containing 1)的反义链即锌脂蛋白反义链1(zinc finger antisense 1，lncRNA-ZFAS1)，是一种长链非编码RNA。最初，lncRNA-ZFAS1被发现对乳腺癌、结直肠癌等肿瘤具有调控作用[4-5]。我们前期研究发现，lncRNA-ZFAS1对心血管系统具有调控作用。lncRNA-ZFAS1是急性心肌梗死的外周血潜在诊断标志物[6]。深入机制研究我们发现，lncRNA-ZFAS1是肌浆网钙ATP酶2a(sarcoplasmic reticulum Ca2+ATPase 2a，SERCA2a)的内源性抑制剂，诱发心肌细胞内钙超载，从而引起心肌梗死后心脏收缩舒张功能障碍[7]。此外，我们还揭示心肌梗死后心肌细胞中lncRNA-ZFAS1的高表达会引发心肌细胞线粒体凋亡途径激活，从而诱发心肌细胞凋亡[8]。

心肌纤维化(cardiac fibrosis，CF)常常伴随病理性心肌肥厚、心肌梗死及心力衰竭等多种心血管疾病发生。心肌纤维化一旦发生难于逆转[9-10]。目前，临床上针对心肌纤维化的特异性治疗手段相对缺乏，是该领域的瓶颈问题。因此，探索心肌纤维化发生发展的关键机制，发现心肌纤维化的新靶点，并针对分子水平的新靶点提出有效的防治措施，具有重要的意义。本研究通过构建在体和离体心肌纤维化模型以及过表达lncRNA-ZFAS1转基因小鼠，探究lncRNA-ZFAS1对小鼠心肌纤维化的调控作用。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂阿佛丁(Avertin)购买自Sigma-Aldrich公司，货号为T48402；lncRNA-ZFAS1的siRNA(siZFAS1)：sense 5′-GCGUGAACUCCUGAGGCGAdTdT-3′和antisense 5′-UCGCCUCAGGAGUUCACGCdTdT-3′购买自广州市锐博生物科技有限公司；血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，AngⅡ)购买自Sigma公司，货号a9525。……