倪文昌 金 泉 王丽艳 查运红

(武汉市第三医院儿科，武汉 430000)

神经母细胞瘤是儿童常见颅外实体瘤之一，占儿童癌症相关死亡人数的15%[1]。其临床表现广泛，部分良性肿瘤不经化疗可自行消退，其他转移性疾病甚至对高强度治疗耐药，即使接受强化治疗，最具侵袭性的神经母细胞瘤患者存活率仍低于40%[2]。神经母细胞瘤进展的机制仍有待进一步研究。长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)被定义为长度超过200个核苷酸的转录本，与包括神经母细胞瘤在内的癌症进展密切相关[3]。研究表明，lncRNA MIR4435-2HG可促进前列腺癌细胞迁移和侵袭[4]。上调MIR4435-2HG可提高胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及小鼠的致瘤性[5]。对DNA甲基化和基因表达谱的综合分析发现，MIR4435-2HG是导致胶质瘤进展的致癌lncRNA[6]。miR-873-5p可作为结直肠癌的肿瘤抑制因子抑制结直肠癌细胞生长、增殖、迁移和侵袭，影响细胞周期，并促进其凋亡[7]。但MIR4435-2HG和miR-873-5p对神经母细胞瘤生物学功能的影响尚未阐明。研究显示，lncRNA有多个miRNA响应元件，如MIR4435-2HG靶向miRNA-487a促进肝癌细胞增殖[8，9]。本文探讨神经母细胞瘤中MIR4435-2HG和miR-873-5p的靶向调控作用，考察MIR4435-2HG在神经母细胞瘤组织及其相应组织正常脊髓背根神经节中的表达，及其对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响，并结合miR-873-5p阐明潜在的作用机制[10]。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1细胞与主要试剂 神经母细胞瘤SK-N-SH细胞、人脐静脉内皮细胞HUVEC购自中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心，MEM培养基、F12K培养基、Lipofectamine 2000购自美国invitrogen公司；胎牛血清购自美国Gibco公司；RT-qPCR相关检测试剂盒购自日本TaKaRa公司；……