全自动氨基酸分析仪测定药物中16种氨基酸
2021-01-21刘文竹李滢倩郜金金
张 鑫,刘文竹,张 艳,李滢倩,郜金金
(1.吉林省食品检验所,吉林 长春 130103;2.吉林省正恒检测有限公司,吉林 长春 130033)
氨基酸在医药上主要用来制备复方氨基酸输液,也用作治疗药物和用于合成多肽药物。此外氨基酸衍生物在癌症治疗上出现了希望。[1]目前氨基酸的分析方法[2]主要有化学方法、荧光光谱法、电化学方法和分光光度法等.全自动氨基酸分析仪[3-7]与其他方法相比,具有灵敏度高、检出限低、操作简单、数据容易分析等优势。本研究运用全自动氨基酸分析仪测定药品中16种氨基酸的方法,节省前处理时间,降低检测成本。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
L-8900高速氨基酸分析仪(日本日立公司);BGZ-246电热鼓风干燥箱(上海博讯实业有限公司医疗设备厂);AB204-N电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司);聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜
混合氨基酸标准品(1 mL,2.5mmol/mL,SIGMA);蛋白水解液用缓冲液PH套装MCI BufferL-8500-PH Kit(WAKO);茚三酮显色液 NINHYDRIN COLORING SOLUTION KIT FOR HITACHI(WAKO);盐酸(优级纯);实验室用水为Milli-Q超纯水。
1.2 试验方法
1.2.1 溶液配制:16种混合氨基酸标准溶液配制;50%盐酸溶液配制:将优级纯盐酸与水等体积混合。
1.2.2 样品的前处理:称取适量样品(氨基酸含量约在10 mg~20 mg)置聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中,加入50%盐酸溶液15 mL,混匀后,在140℃干燥箱中水解4 h,转移全部水解液置50 mL容量瓶中,加入超纯水定容至刻度线,混匀后,从中取出10 mL溶液置50 mL容量瓶中,加入超纯水定容至刻度线,混匀,过滤,上机。
1.2.3 氨基酸分析仪仪器运行条件:荧光检测器;检测波长440、570 nm;离子交换色谱柱;柱温57℃;……
