姜启娟，王冰冰，殷 丹

（通化市食品药品检验所，吉林通化 134001）

1 仪器与试药

仪器：高效液相色谱仪（型号：日本岛津L C-2010AHT）、电子天平型号（BT25S 感量：0.1/0.01mg北京赛多利斯仪器天平有限公司）；对照品：金丝桃苷（111521-201507 、含量：以94.3%计；产地：中国食品药品检定研究院）；水（自制纯化水）、乙腈（色谱纯）、甲醇、乙醇（分析纯）

2 色谱条件及溶液的制备

2.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C18（直径4.6 mm，长度250mm，粒径5μm），以乙腈-3%冰醋酸溶液（13：87）为流动相；检测波长为360nm。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备

取金丝桃苷对照品，精密称定，置量瓶中，加60%乙醇溶液制成浓度为每1ml含20µg的溶液，摇匀，过滤，取续滤液作为对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备

精密称取金盏银盘粉末约1g(过四号筛)，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇溶液25ml，称定重量，加热回流提取1小时，放置室温，再称定重量，用60%乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置分液漏斗中，用石油醚（60～90℃）40ml，分2次洗涤，弃去石油醚液，合并两次乙醇液，回收溶剂至近干，残渣加甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

3 方法学验证与结果

3.1 标准曲线的制备

标准曲线母液的制备：取金丝桃苷对照品约10mg，精密称定，置25ml容量瓶中，用60%乙醇溶液溶解稀释至刻度，摇匀，再精密量取12.5ml置50ml量瓶中，用60%乙醇溶液溶解稀释至刻度，摇匀作为母液。

标准曲线溶液的制备：用刻度吸管吸取母液1.25、2.5、5、7.5、10ml，置25ml容量瓶中，加60%乙醇溶液至刻度。精密吸取上述溶液各10µl进样，结果以对照品量为横坐标，以峰面积为纵坐标，计算所得回归方程及数据见表1。……