葱白提取物对心肌缺血再灌注损伤模型大鼠心肌细胞凋亡的作用及机制研究
2021-01-18杨剑锋柯于鹤田立群
杨剑锋,柯于鹤,雷 杰,田立群*
(1. 神农架林区中医医院,湖北 神农架 442421;2. 武汉市中西医结合医院,湖北 武汉 430022)
急性心梗发生后,临床上通过溶栓或冠脉介入等方法能够极大地恢复心肌灌注能力,减少心肌梗死面积,改善心功能,但同时因为血流恢复可能造成心肌缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,I/R)。它主要表现为心肌持续缺血一段时间后再次恢复供血,而心肌的结构损伤和功能障碍加重。目前认为该过程的发生与氧自由基增加[1]、Ca2+超载[2]、代谢紊乱[3]等密切相关。最近研究人员进一步发现I/R 与心肌细胞凋亡密切相关[4-5],当心肌细胞受损时,促凋亡物质如凋亡诱导因子、细胞色素C 等释放,会加速心肌细胞凋亡,故防止或减轻心肌细胞凋亡是防治I/R 的重要手段。
本课题组前期研究发现葱白提取物(fistular onion bulb,FOB)在心肌缺血再灌注过程中,能明显缩小大鼠I/R 心肌梗死面积,改善心功能,降低心肌细胞的凋亡率[6-7]。为进一步研究FOB在I/R 的保护机制,本课题拟构建I/R 大鼠模型,探讨FOB 对I/R 大鼠心肌组织的影响,并从p38 MAPK 信号通路研究对细胞凋亡的影响,为临床心肌缺血再灌注损伤的防治提供新思路。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物 SD 雄性大鼠,SPF 级,36 只,体质量200 ~220g,购于湖北省实验动物研究中心,动物许可证号:SYXK(鄂)2017-0067。
1.1.2 药物 葱白提取物(武汉市第一医院提供,批号:20170326)。
1.1.3 试剂 大鼠p38、p-p38(磷酸化)、p53,β 微管蛋白(β-tubulin)抗体(武汉ABclonal 生物科技有限公司,批号分别为:A5521、AP0056、A0225),辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG 抗体(武汉ABclonal 生物科技有限公司,批号为:AS003),其余试剂均为市售分析纯。……