任理，王德勤

(广州白云山和记黄埔中药有限公司现代中药研究院，广东 广州 510515)

气道与外界相通，是呼吸系统的第一道防线，容易直接接触吸入性致病因素。当机体抵抗力降低时，吸入的有害物质如粉尘颗粒、病原体等会引起气道上皮损伤，从而引发呼吸系统疾病。气道上皮受损后机体启动修复过程，以维持完整的屏障，缓解疾病。绿原酸是一种苯丙素类化合物，是山银花、金银花、杜仲等药材的主要活性成分，具有抗菌、抗病毒、抗氧化、降血糖、降血脂和抗肿瘤等生物活性[1]。绿原酸还具有保护细胞的作用。文献报道绿原酸对香烟烟雾引起的HEK293 细胞损伤有保护作用，能提高细胞存活率[2]，还能减轻PM2.5引起的CHO细胞损伤，降低细胞内氧化应激反应[3]。目前绿原酸对气道上皮损伤的修复作用研究较少，但其具有的抗炎、抗氧化、保护细胞、免疫调节等作用与损伤修复密切相关[4]。基于此，本研究以人支气管上皮细胞(16HBE细胞)为载体，体外模拟气道上皮损伤，观察细胞生长情况及相关因子的表达，探讨绿原酸对气道上皮受损后的修复作用。

1 仪器与试剂

1.1 试剂

绿原酸(广州昂飞生物科技股份有限公司，批号150801);泼尼松(MEDChem Express公司，批号HY-B0214);RMPI-1640培养基、胎牛血清(gibco);EGF、TGF-β1、IL-10、TNF-α、IL-6试剂盒(深圳中生穗丰);SDS-PAGE凝胶配置试剂盒(上海贝博生物科技有限公司);彩色预染低分子蛋白marker(Thermo Fisher);ERK1+ERK2多克隆抗体(Abcam);羊抗兔IgG(Earthox);香烟(黄金叶)。

1.2 细胞株

16HBE细胞来自广州医科大学呼吸病理研究所重点实验室。

1.3 主要仪器

HH.CP-01 CO2细胞培养箱(上海博讯实业有限公司)；……