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流产衣原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

2021-01-01刘东慧李兆才谭书敏周继章

中国兽药杂志 2021年11期
关键词:方法

温 渊,刘东慧,李兆才,谭书敏,梁 林,黄 勇,周继章*

(1. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,兰州 730046;2. 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100)

衣原体(Chlamydia)是一类专性胞内寄生的革兰氏阴性菌,具有复杂的形态结构,依赖宿主的能量合成自身的代谢物质,是一种重要的人畜共患病原体[1]。衣原体科下只有一个衣原体属,共有14个衣原体种[2],其中的流产衣原体(Chlamydiaabortus,C.abortus)是导致绵羊衣原体病的主要原因。绵羊衣原体病是一种重要的人畜共患病,又称绵羊地方性流产(Enzootic abortion of ewes, EAE)[3]。母羊感染流产衣原体后会导致化脓性胎盘炎、早产、产出死胎或虚弱的羊羔,并且母羊成为病原体携带者,在孕期通过胎盘、流产胎儿或阴道分泌物排出大量病原体,感染其他动物或人类[4-5]。此外,孕妇可能在接触感染动物后患病,导致流产[6]。流产衣原体的主要宿主是家畜,但在全球各地的其他物种中也发现了零星病例,如马和鹿等[7-8],甚至野鸭中也有发现,感染宿主极其广泛,其引起的大规模流产给全球大多数地区造成了不容忽视的经济损失[7]。

目前我国对流产衣原体大规模诊断的方法主要有IHA技术和常规PCR技术,但IHA技术操作繁琐且灵敏度较低,常规PCR只能进行定性检测。实时荧光定量PCR方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好及操作简便等特点,在分子生物学诊断方面有广泛应用。国内针对流产衣原体实时荧光定量PCR方法的研究相对较少,张志君和周丹娜等分别建立了针对流产衣原体的SYBR Green Ⅰ方法和分子信标探针方法[9-10],但这些方法尚未在临床检测和动物衣原体病的流行病学研究中大规模应用。……

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