廖小立 陶宏婷 吴端生 姚 峰 陈科洁

(1.湖南交通工程学院,衡阳 421001)(2.湖南省永州职业技术学院,永州 425100)(3.南华大学实验动物学部,衡阳 421001)

铯-137(137Cs)是一个在核反应堆裂变产生的放射性核素,很容易在水和空气中传播,其半衰期为30年,按放射性核素的毒性分组,137Cs属于中度毒性核素,能释放出β和γ两种射线。随着核工业的发展和核电站核泄漏事故的发生,137Cs-γ对环境已经构成了一定的危害。研究137Cs-γ辐射的生物效应,有益于核辐射污染监测与防护[1]。

扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)是 Vos等人于1995年创建的一种分子标记技术[2]。AFLP是一种评估生物种群间或种群内遗传变异的高度可靠的遗传标记,已成功地应用于多种水产养殖动物的遗传多态性分析[3-4],也有少量文献报道将AFLP标记应用到环境污染物或核辐射胁迫下的遗传毒性效应检测中[5-8]。本文研究137Cs-γ辐照对实验红鲫AFLP多态性的影响,探讨AFLP标记应用到辐射生物监测的可行性,为推广实验红鲫在环境安全性评价中的应用积累实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验鱼及饲养

2年龄的实验红鲫 C1HD系,50尾,雌雄各半,平均体长115 mm,平均质量34.6 g,养殖用水为曝气3天的自来水,水温(20.4±1)℃、pH值(6.84±0.4)、溶氧量(6.21±0.4)mg/L。遗传质量均符合湖南省地方标准[9],由南华大学实验动物学部提供。

1.2 主要仪器及试剂

HXFS-IA生物辐照仪:中国核工业集团;水平电泳槽(DYCP-38B):北京市六一仪器厂;凝胶成像系统:Tanon;紫外可见分光光度计(UV2450):SHIMADZU(日本);梯度 PCR仪:Bio-rad(美国)。AFLP引物:由上海生工公司合成。琼脂糖:Spanish;甲酰胺加样缓冲液:leagene;SDS,λDNA/HindⅢ:购于北京天根公司……