范 涛 武卫国 冯 宾 刘佐民 柳全明

(中国食品药品检定研究院,北京 102629)

剖腹产净化是实验动物常用生物净化手段之一。对于封闭群品系,剖腹产净化会产生“奠基者”效应而影响群体的遗传特性[1]。通过人为选择,群体中仅有部分个体进入到了下个阶段的繁育体系中,从而降低群体的多态性,同时,群体有效含量的减少,会加速近交系数上升速率,降低群体杂合度。然而,种群的净化又是维持微生物等级(SPF级)必不可少的环节,因此,在每次净化建群后,必须对遗传质量进行监测。

微卫星DNA(microsatellite DNA)具有基因组分布广、多态性高、重复性好等优点,用于实验动物遗传检测的研究已开展多年[2-6]。近几年,实验大、小鼠微卫星DNA遗传检测方法正在制定相应的国家标准,以弥补我国实验动物分子遗传检测方面的空白[7]。豚鼠是常用的实验动物之一,大量研究表明[8-13],微卫星DNA方法同样适用于封闭群豚鼠的遗传质量评价。本实验旨在通过剖腹产净化获得SPF级Harley豚鼠种群,通过遗传检测,了解净化后种群的遗传质量,为日后该种群的管L与应用提供基础数据支持。

1 材料与方法

1.1 豚鼠剖腹产净化

1.1.1 种鼠选择:原生产群采用4组循环交配方案,每组包含15～20个繁殖单元,每个繁殖单元雌雄比例1∶5。分别从各组选择7～8个繁殖单元,挑选其中的雌、雄个体(共计30个繁殖单元)作为种鼠(雄鼠确认可育,雌鼠为经产个体),按1∶1合笼一周后,雌、雄分开饲养。

1.1.2 剖腹产手术:从合笼开始计算,于65～70 d,用“综合判断法”(耻骨测量法+观察法)[14]对受孕母鼠进行临产期判断,对临产的孕鼠进行剖腹产手术。……