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Gene Xpert-MTB/RIF法快速诊断脊柱分枝杆菌及利福平耐受性的临床应用研究

2020-12-13姚海山卢炯炯沈生军

临床医药文献杂志(电子版) 2020年79期
关键词:检测

姚海山,卢炯炯,郭 鑫,沈生军*

(青海大学附属医院,青海 西宁 810000)

结核病是发展中国家最常见和最具挑战性的疾病之一,我国是结核病的高发国家,同时也是耐多药结核的高负担国家。根据全球结核病报告,肺外结核病约占所有结核病的20%,其中脊柱结核是最常见的肌肉骨骼结核。脊柱结核发病隐匿,早期无典型临床表现,且病灶位于椎体等深部组织,临床标本不易获得。因此,脊柱结核诊断较为困难。当大部分患者确诊时,已存在明显的脊柱骨质破坏,并且常伴有神经功能的损伤。所以脊柱结核的早期诊断及规范化治疗有着重要意义。在已有的临床诊断技术中,传统显微镜检查阳性率低,细菌培养时效性差,影像学表现特异度较低等诸多问题,延长了诊断时间,延缓了治疗进展。

1 Xpert-MTB/RIF技术的基本情况

Xpert-MTB/RIF技术是一种利用GeneXpert平台(Cepheid, Sunnyvale, CA, United States)进行的自动聚合酶链反应(PCR)测试(即分子测试)。能够检测结核分枝杆菌和利福平耐药性,是一种简便、快捷的实践技术。Xpert-MTB/RIF技术利用分子信标技术检测利福平耐药性,分子信标是一种核酸探针,可以识别和报告正常的、利福平易感的野生型rpoB基因序列的存在或缺失。使用了5个不同颜色的信标,每个信标在扩增的rpoB基因中覆盖一个单独的核酸序列。当信标与匹配序列结合时,它会发出荧光(或点亮),这表明存在利福平敏感结核病特有的基因序列之一。

Xpert-MTB/RIF技术的操作流程简单方便,实验室将接收的组织样本用无菌研磨机在1~2毫升无菌生理盐水中研磨,获得质地均匀的悬浊液,再用NaLC-NaOH对材料进行去污。……

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