李现民，曹丽丽

（山东省安丘市人民医院，山东 安丘 262100）

胃癌（GC）在中国导致大量癌症诱发的死亡，尽管手术切除仍然是GC患者的有效治疗方法，但由于原发性癌细胞的局部扩散和远处转移，在治疗后仍可能出现癌症的复发和转移[1]。因此，深入研究GC形成背后的精确分子机制对于开发GC的分子标志物和治疗策略很重要。本文进一步阐明GC细胞转移特性背后的分子机制，为优化GC治疗方案提供理论依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究背景

转移性胃癌是一种典型的难治性疾病。抗转移治疗的进展受到阻碍，因为调控GC细胞转移的潜在机制没有得到很好的阐明。

1.2 方法

1.2.1 样本获得

从2000年至2010年在安丘市人民医院临床诊断出的患者中获得了三十对胃癌（GC）组织和相应的正常组织。研究事先获得患者的同意，并且得到了机构研究的授权，经安丘市人民医院伦理委员会通过。

四种GC细胞系（MKN45，MKN28，SGC7901和BGC823），HEK-293T细胞和人胃上皮细胞（GES-1）购自广州珍妮生物技术有限公司。将细胞系维持在37℃的5%CO2培养箱中。

1.2.2 转染

用Lipofectamine 3000进行载体或短发夹RNA的转染。

1.2.3 细胞增殖测定

SGC791或BGC823细胞接种到96孔板中。将细胞培养24小时，48小时或72小时后，通过MTS细胞增殖比色测定试剂盒在490nm处测定OD值[2]。

1.2.4 集落形成分析

SGC7901细胞在六孔板中培养，并与新鲜培养基孵育两周，之后用4%甲醛固定细胞集落，并用1%结晶紫染色。

1.2.5 迁移测定

将SGC7901或BGC823细胞接种到六孔板中，使其融合过夜，使用100μl尖端制造人工伤口；后使用不含FBS的培养基培养细胞24小时，在0 h和24 h记录伤口宽度的图像[3]。……