李 艳，周露秋，任黔川

0 引言

宫颈癌(Cervical cancer，CC)是危害女性健康的主要恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率在全世界女性恶性肿瘤中居第4位[1]。近年来，虽然我国宫颈癌整体死亡率在宫颈癌普查和人乳头瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)疫苗的积极推广下有所下降，但城市妇女死亡率仍呈持续上升趋势[2-3]，给宫颈癌的治疗带来巨大挑战。目前，越来越多的研究发现，中草药在宫颈癌的治疗中发挥着积极作用[4-6]。吉马酮(Germacrone)作为中草药姜黄提取物中的主要生物活性成分之一，具有广泛的药理作用，如抗肿瘤、抗氧化、抗炎等[7-13]，但吉马酮在宫颈癌中的作用国内外尚无报道。本实验拟探讨吉马酮对人宫颈癌Hela细胞的作用及其机制，为宫颈癌药物研发提供相关理论依据。

1 材料和方法

1.1 试剂与仪器 吉马酮(Solarbio，批号：423B0-22)；MEM培养基(Procell，批号：WH01111905XP)；青链霉素双抗(Hyclone，批号：J180034)；胎牛血清(CLARK，批号：JC63468)；CCK-8试剂盒(Beyotime，批号：68121000);Transwell小室(Corning，批号：05619049)；人工基底膜Matrigal(Corning，批号：9056014)；Annexin V-APC/PI试剂盒(批号：20190809)与细胞周期检测试剂盒(批号：20190805)均购自KeyGEN bioTECH公司；Bax抗体(Abcam，批号：ab32503)；Bcl-2抗体(Affinity,批号：AF6139)。倒置相差显微镜(日本Olympus公司)；流式细胞仪(美国BD公司)；台式高速冷冻离心机(上海卢湘仪仪器厂)；Western blot电泳仪(北京市六一仪器厂)等。

1.2 细胞株 人宫颈癌Hela细胞株(西南医科大学中心实验室)。

1.3 方法

1.3.1 药物配置 将11 mg吉马酮溶于500 μl的二甲基亚砜(DMSO)中，制备成100 mmol/L的母液，置于-20 ℃保存备用。

1.3.2 细胞培养 将 Hela细胞培养于MEM培养液(青霉素100 U/ml、链霉素 100 μg/ml、10%胎牛血清)中，置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养，当细胞生长密度为80%～90%时，按1∶3传代培养。

1.3.3 CCK-8检测细胞增殖 取对数生长期Hela细胞，加入培养基制备单……