基于微流控阻抗传感器检测番茄环斑病毒
2020-10-21许庆铎
李 琛,许庆铎,边 勇
(1. 中国计量大学质量与安全工程学院,杭州 310018;2. 中国海关科学技术研究中心,北京 100026)
0 引 言
近年来,随着中国对外贸易持续扩大、国际旅游更加便捷及跨境电商不断发展,中国国门生物安全形势日趋严峻。外来有害生物的数量和种类出现前所未有的增加,危害着中国农业、生态环境,乃至破坏经济、社会的稳定,威胁国家安全。番茄环斑病毒(Tomato Ringspot Virus,ToRSV)作为一种重要的作物病原体,能够感染大豆、番茄、烟草、葡萄、苹果等 150 多种农作物,导致严重的病害[1-2]。目前,ToRSV 已成为中国禁止入境的Ⅰ类检疫性病毒[3]。
国内外检验 ToRSV 的常用方法是聚合酶链式反应PCR。如赵文军等[4]采用荧光 RT-PCR 在 2 h 内实现了ToRSV 的检测;余澍琼等[5]在PCR 的基础上采用逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)检测出ToRSV,相比荧光 RT-PCR 缩短了近一倍时间;易汪雪等[6]采用多重RT-PCR 检测大豆种子中的ToRSV,得到0.58μg/mL 的低检出限。基于 PCR 的检测方法能够实现 ToRSV 的有效准确检测,但设计特异性引物、扩增测序等操作需要专业人员进行,不适用于现场的快速检测[7]。近年来备受关注的微流控技术则能够很好的弥补这一不足。微流控技术将病毒富集、捕获、检测、分析等过程集成到一块几平方厘米的芯片中[8-10]。1992 年,Manz 等[11]在玻璃上设计微通道,从而开创了微流控技术,Gomez 等[12]基于微流控技术集成制造了第一个白金叉指阵列电极的硅基微流控芯片,结合阻抗法研究细胞的代谢活性。近来,微流控技术与电化学阻抗检测方法结合的微流控阻抗传感器愈……
