周嫔 徐伟铭 叶恩如 张玲娜

特殊染色已经开展了100多年，常用于显示在HE染色中难以观察或观察不到的组织成分（如结核杆菌、真菌、网状纤维等），是临床病理诊断重要的辅助技术。特殊染色过程复杂，影响因素多，设立合适的阳性对照是特殊染色质量控制的关键。归档人体组织蜡块是特殊染色最常用的阳性对照，但存在与检测组织混淆的可能，尤其是切片外借会诊时，有可能误判。目前给每例特殊染色设立阳性对照的实验室不多。笔者尝试用市售高活性酵母菌和蛋清的混合团块制成蜡块，用于作为显示真菌的特殊染色的新型阳性对照。以常用过碘酸希夫染色（PAS染色）和六胺银染色为例，现介绍如下。

1 材料和方法

1.1 试剂和仪器 珠海贝索生物技术有限公司PAS染色、六胺银染色试剂盒，日本樱花全封闭组织脱水机VRP-6，日本樱花组织包埋机，德国莱卡石蜡切片机。

1.2 对照蜡块制作

1.2.1 活性酵母菌备用 市售安琪高活性干酵母菌0.05 g，溶于1 ml温蒸馏水中。

1.2.2 制备蛋清基质 取1只新鲜鸡蛋或鹌鹑蛋，用一次性吸管吸出蛋清置于烧杯中，搅拌均匀，包上保鲜膜，冰箱冷藏备用。

1.2.3 酵母菌蛋清混合团块制备 在酵母菌溶液中滴加200～300倍体积的蛋清，用震荡器混匀。沿离心管管壁缓缓加入95%乙醇溶液40 ml，静置30 min，2 500 r/min离心5 min，倒去上清液，沿离心管管壁缓缓加入10%中性甲醛溶液 40 ml，固定 6～8 h，2 500 r/min 离心 5 min，倒去上清液，留沉淀物备用。

1.2.4 组织脱水包埋 将酵母菌蛋清混合团块用胃镜纸包好，装入包埋盒中，在脱水机中脱水，透明，浸蜡。……