荷叶水提物对3T3-L1前体脂肪细胞增殖、凋亡及前体脂肪细胞、成熟脂肪细胞IL-6 mRNA、TNF-α mRNA的影响*
2020-08-13吴冬梅张晓东
吴冬梅,张晓东
(1.河南省中医院,河南 郑州 450002; 2.河南中医药大学第一附属医院,河南 郑州 450000)
多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)以持续无排卵、高雄激素含量和胰岛素抵抗为特征[1-3]。PCOS患者主要表现为胰岛素抵抗(insulin resistance,IR) 和代偿性高胰岛素血症,是引起月经不调、闭经和不孕的常见原因之一,还与其他心脑血管疾病的发生密切相关[4-5]。遗传因素、下丘脑-垂体-性腺轴功能失调、卵巢及肾上腺功能异常、胰岛素抵抗、肥胖[6]都与PCOS的发病有联系。脂肪组织是人体重要的能量稳态调节器,是触发胰岛素抵抗炎症反应的重要场所,脂肪组织分泌功能紊乱在IR中扮演了重要的角色。荷叶是一种被广泛研究的植物化学物,但其对前脂肪细胞增殖、分化、凋亡的影响,以及相关机制仍不明确。本研究检测荷叶对3T3-L1脂肪细胞的影响,以期从分子生物学角度阐述荷叶降脂的作用机制。
1 材料与方法
1.1 药品、试剂与仪器
荷叶,购自河南中医药大学第一附属医院药房,水煮提取,高压灭菌,制备中药水溶性提取物(extracts of Chinese medical herbs,ECMH),4 ℃备用。DMEM培养基,美国Gibco公司产品,批号12100046;胰蛋白酶(批号20160302)、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT,批号20150120),均为北京Solarbio公司产品;荧光定量 PCR Mix(批号A25741)、逆转录试剂盒(批号18090050),均为美国Thermo Fisher公司产品;TRIZOL试剂,美国Invitrogen 公司产品,批号15596026;胰岛素(批号I0516)、地塞米松(DEX,批号D4902)、 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX,批号17018)、油红O(批号O0625),均为美国Sigma公司产品。96孔细胞培养板,美国Costar公司产品,批号3516;OLYMPUS CK40 倒置荧光显微镜,日本奥林巴斯公司产品;CO2细胞培养箱,美国Thermo公司产品;高速台式冷冻离心机,德国Herseus公司产品;……
