刘 尧， 刘 成 晟， 成 艳， 陈 明

( 大连工业大学 生物工程学院, 辽宁 大连 116034 )

0 引 言

二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的ω-3多不饱和脂肪酸，具有促进脑细胞发育、增强视力、预防和治疗心脑血管疾病等生理功效[1]，被誉为新一代功能因子，广泛用于食品医药行业。传统的DHA主要来源于深海鱼油，但鱼油的品质与产量难以满足商业化发展需求。裂殖壶菌(Schizochytriumsp.)是一种富含DHA的海洋真菌，具有生长速度快、易于培养、细胞内油脂含量高等优点，是商业化生产DHA的理想菌种之一，利用Schizochytriumsp.生产DHA已成为目前国内外的研究热点[2-3]。近年来，关于裂殖壶菌生产DHA油脂的报道更多地集中在发酵工艺和培养条件[4-5]，产量问题一直不理想。氮源对微生物菌体生长、油脂合成启动、油脂产量和油脂组成等均产生重要影响[6-7]。本实验利用一株Schizochytriumsp. DP-16发酵产DHA油脂，研究了不同氮源对DHA油脂生成的调控作用，以期为微生物发酵产DHA油脂的工业化生产提供参考。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 菌 种

Schizochytriumsp. DP-16，本实验室保藏。

1.1.2 培养基

种子培养基(g/L)：葡萄糖30，酵母浸粉10，蛋白胨2，海水晶15，pH 6.0。

初始发酵培养基(g/L)：葡萄糖80，酵母浸粉5，海水晶15，MgSO4·7H2O 5，KH2PO4·H2O 7；pH 6.0。

1.1.3 试剂与仪器

葡萄糖、MgSO4·7H2O，天津大茂化学试剂厂；酵母浸粉、蛋白胨，北京奥博星生物技术有限责任公司；海水晶，山东强隆海水晶厂；KH2PO4·H2O，天津科密欧化学试剂有限公司；三氟化硼-甲醇，上海安谱科学仪器有限公司。

Agilent Technologies GC 7890气相色谱仪，安捷伦科技有限公司。

1.2 方 法

1.2.1 种子液制备

将甘油管接种于斜面后，在25 ℃条件下培养48 h，用接种环挑取4～5环接入装有30 mL种子培养基的250 mL三角瓶中，25 ℃、160 r/min振荡培养48 h。……