刘 冬，赖伟男 （. 陆军军医大学新桥医院药剂科，重庆 400037；. 南方医科大学南方医院风湿免疫科，广东 广州

510515）

成纤维细胞的增殖和活化引起的细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的累积是肺纤维化的主要病理基础[1]。肺纤维化治疗难度大，且发展到晚期纤维化过程不可逆转，而一些药物的长期使用会提高肺纤维化的发生风险，对于这临床的一类并发症应格外重视。来氟米特（leflunomide，LEF）是治疗类风湿性关节炎的常用药物，但是有临床报道称，长期服用LEF 可能提高肺纤维化的发生风险，但是也有研究认为LEF 对肺纤维化影响不大[2]。微小RNA（microRNA，miRNA）长度约为18～22 个核苷酸，虽然不具备编码功能，但是可通过识别和碱基配对的方式与靶基因信使RNA（message RNA，mRNA）的3'非翻译区（3'UTR）结合，从而参与基因表达的调控[3]。miR-449a 具有抑制肿瘤细胞的增殖并诱导凋亡的作用[4]，并且最新研究发现miR-449a 可能与肺纤维化有关，在二氧化硅诱导的肺纤维化模型中，miR-449a 可通过调节自噬缓解纤维化[5]。c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）是调节细胞增殖、凋亡和分化的重要蛋白，其磷酸化后可通过信号转导调控细胞生物学行为[6]。本文发现了miR-449a 的过表达会显著缓解由LEF 引起的肺成纤维细胞的增殖，而沉默miR-449a 对细胞的影响相反，这可能是LEF 引起肺纤维化的机制之一，报道如下。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

人肺成纤维细胞MRC-5 购自美国ATCC；LEF（苏州长征-欣凯制药有限公司，国药准字H20000550）；RPMI-1640 培养基以及血清购自美国Gibco 公司；miR-449a mimic 和inhibitor 质粒由Genepharma 公司构建；

LipofectamineTM2000（美国Invitrogen 公司）；荧光显微镜（Olympus BX51）；Model 680 酶标仪（Bio-Rad，美国）；流式细胞仪（BD FACScanto II，Becton Dickinson，美国）。CCK-8 试剂盒（武汉华美公司）；……