光修复对脊髓栓系伴神经源性膀胱大鼠的作用研究
2020-08-06姬广春侯利民
呼 和 蒋 飞 姬广春 侯利民 乔 飞
脊髓栓系综合征(tethered cord syndrome,TCS)多见于儿童或青少年,处于生长发育期的患儿往往会呈现进行性加重,严重者可导致肾功能衰竭。 目前多采用脊髓栓系松解术来防止神经损伤进一步恶化,但对于已存在的神经损伤基本无治疗意义[1]。 因此,重建TCS 患儿的膀胱功能可能对治疗儿童TCS 伴神经源性膀胱功能障碍具有重要意义。
Channelrhodopsin-2(ChR2)作为一种感光性蛋白质,来自于单细胞绿色藻类[2]。 在特定的光谱照射条件下,ChR2可快速形成光电流,使细胞发生去极化,引发兴奋,从而实现对体内神经细胞的精准调控[3]。 该技术目前已经应用于多个生理学研究领域,但在治疗儿童TCS 伴发神经源性膀胱功能障碍方面还未见报道[4]。 本研究通过动物实验,将重组后的Ad-EGFP-ChR2腺病毒载体精确转染至支配膀胱逼尿肌骶髓中间外侧柱的副交感神经核(sacral parasympathetic nucleus,SPN)内,给予特定光谱照射刺激活化兴奋SPN,模拟排尿中枢的神经活动,旨在评估光感基因技术对修复TCS 伴神经源性膀胱功能的可行性,为儿童TCS 伴神经源性膀胱的临床治疗提供实验理论基础。
材料与方法
一、实验材料
(一)实验动物
实验动物由中国人民解放军军事医学科学院动物所提供,本研究共纳入雌性大鼠46 只,体重(60 ±10)g,鼠龄4 周。 常规饲养1 周,饲养间室温21℃~25℃,相对湿度40%~60%,供应无菌饲料和无菌水并自由摄食、饮水,每日光照8 h,检疫合格,实验在伦理委员会动物指导协议下进行,建模前12 h禁食禁饮。 尿动力学检查指标(膀胱最大容量、逼尿肌漏点压、残余尿量)均无异常。……
