杨大艳 陈其青 钟婷婷 张 敏 陈 艳 谢 琳 王明华 景香香

研究［1］表明，肝癌的形成与演变经历了长期复杂的过程，且受较多因素影响，其实质为多基因的病症。所以，基于基因层面考虑，利用载体将靶基因导入至机体内，在靶组织内特异性地以可调控的方式进行表达，不会对正常肝细胞的表达产生影响，以达到相应的治疗效果［2］。基因治疗较传统治疗方法具有独特的优势［3］，在超声聚焦辐照的作用下，细胞膜会产生空化效应与声孔效应等物理变化［4］，可协助基因及药物进入肿瘤细胞内，低强度聚焦超声（LIFU）辐照可能成为最优的基因转染方法。本实验拟以叶酸（FA）进行表面修饰，构建一种载有Survivin启动子联合疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶自杀基因［5］的液态氟碳纳米粒，并观察其表征及靶向性，为进一步提高多功能全氟碳纳米粒在肿瘤诊断及治疗中的发展提供理论依据。

材料与方法

一、实验材料与试剂

羧基端乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA，乳酸与羟基乙酸聚合比例50∶50，分子量25 000，济南岱罡生物工程有限公司）；FA（美国 Sigma公司）；pEGFP-N1（上海生工生物工程有限公司）；S-HSV1-TK（上海生工生物工程有限公司合成）；全氟戊烷（PFP，北京百灵威科技有限公司）；多聚赖氨酸（美国Sigma公司）；聚乙二醇（PEG，北京键凯科技有限公司）；聚乙烯醇（PVA，美国阿拉丁试剂）；二氯甲烷（重庆川东化工集团）；琼脂糖（重庆惠利试剂公司）；PBS缓冲液（美国Sigma公司）；DiI红色荧光探针（碧云天生物技术研究所）；FITC标记的小鼠抗叶酸IgG（英国Abcam公司）；LB培养基（美国Sigma公司）；HepG2细胞由重庆医科大学超声影像学研究所赠予；……