王 方，王 昕，刘 哲，惠凌云，冯 艾，李 娜，王亚文,

1.西安交通大学第一附属医院检验科，陕西 西安 710061；

2.西安交通大学第一附属医院生物样本资源中心，陕西 西安 710061

慢性粒细胞白血病（chronic myelogenous leukemia，CML）是起源于造血干细胞的恶性增殖性疾病［1］。95%的患者骨髓细胞携带t (9,22)染色体易位。该突变形成的BCR/ABL融合基因编码并表达BCR/ABL融合蛋白。作为非受体型酪氨酸激酶，BCR/ABL融合蛋白在细胞质中能够自身磷酸化活化并激活下游STAT5、PI3K及Ras等信号通路，影响细胞的正常生物学行为［2-4］。以伊马替尼（imatinib）为代表的特异性酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitor，TKI）能够靶向抑制BCR/ABL基因的磷酸化活化，并为CML的治疗带来了革命性突破［5］。然而也有诸多局限，首先，急变期CML易获得二次突变，TKI对于该期患者疗效欠佳［6］；其次，即使获得缓解的患者也存在复发的可能，而TKI并不能很好地控制复发病情；再次，近年来大量研究证实，CML肿瘤干细胞的存活并不依赖于BCR/ABL，即使被TKI完全阻断，肿瘤干细胞也不能有效地被诱导凋亡［7］。因此，寻找替代治疗靶点是治愈CML亟待解决的问题。本研究通过分析CML患者及健康体检者标本发现，3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1（3-phosphoinositide-dependent kinase-1，PDK1）在CML细胞中表达升高。抑制其活性对肿瘤细胞具有明显的抗增殖和促凋亡的效应，同时也能够增强细胞对imatinib的敏感性。因此作为潜在的治疗靶点，PDK1值得后续深入研究。

1 材料和方法

1.1 主要试剂

PDK1小分子抑制剂GSK2334470购自美国Sigma-Aldrich公司，imatinib购自美国Selleck公司，细胞计数试剂盒（cell counting kit-8，CCK-8）及Annexin Ⅴ-FITC/PI凋亡试剂盒购自杭州联科生物技术股份有限公司，外周血……