范梦男，张 博，陈苏宁*

0 引言

功能性消化不良(Functional dyspepsia，FD)是一种或一组起源于胃及十二指肠区域，临床无其他器质性、系统性或代谢性疾病的原因能解释的病症总称[1]。FD病理机制复杂，目前认为与胃肠动力障碍、遗传易感性、幽门螺杆菌感染、内脏高敏感性、社会心理等因素相关[2-3]。近年来，脑肠轴(Brain-gut axis,BGA)异常成为FD的关注热点[4]。脑肠肽(Brain-gut peptide,BGP)是BGA的主要作用物质，脑肠肽水平的变化是引起FD胃肠动力的因素之一。5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)是重要的脑肠肽之一，主要分布在胃肠道黏膜。5-羟色胺受体(5-HT receptor，5-HT3aR)是5-HT高亲和性的结合抗体，二者结合以发挥5-HT调节胃肠道的动力功能。

针对FD的发病原因，现代西医学主要采用综合对症治疗，包括促进胃肠蠕动、抑酸、保护胃黏膜、抗Hp、抗抑郁焦虑等，但多不能根本解决问题。本研究以胃痛消痞方干预实验性FD大鼠，观察FD大鼠胃肠动力及胃窦组织5-HT3aR蛋白的变化，探讨胃痛消痞方治疗FD的可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物 雄性、健康SPF级SD大鼠48只(250～280 g/只)，购于北京华阜康生物科技股份有限公司，许可证号：SCXK(京)，2014-0004。

1.2 实验药物 枸橼酸莫沙必利片，购于亚宝药业集团股份有限公司，批号：H20090158。胃痛消痞方(中国医科大学附属盛京医院中药房)，免煎中药颗粒剂(北京康仁堂药物有限公司)组成：党参10 g、白芍20 g、白术20 g、延胡索20 g、柴胡12 g、砂仁15 g、枳实12 g、炒麦芽20 g、鸡内金10 g，焦山楂10 g、炙甘草6 g。实验时均以蒸馏水配制成所需浓度。各治疗组大鼠每日给药量均按人体等效剂量(g/kg)的6.3倍计算：莫沙必利组大鼠的等效剂量为1.575 g/(kg·d)，胃痛消痞方组大鼠的等效剂量为16.275 g/(kg·d)。实验时均以蒸馏水配制成所需浓度。

1.3 主要试剂和仪器 GNP-9080型隔水式恒温培养箱(上海精宏实验设备有限公司)，BL-420S生物技能实验系统：取羟甲基纤维素5 g，蔗糖4 g，奶粉8 g，碳素墨水2 ml，淀粉4 g，分别溶于125 ml蒸馏水中，均匀搅拌，调配成约150 ml(150 g)的半固体糊，并储存于4 ℃冰箱中。

1.4 方法

1.4.1 FD模型的制备 将大鼠适应性喂养3 d后，将48只大鼠随机分为4组：空白对照组(空白组)、模型对照组(模型组)、胃痛消痞方组(中药组)、莫沙必利组(西药组)，每组12只。采用改良郭氏夹尾刺激法联合张氏不规则喂养法[5-6]复制FD大鼠模型。首先，将卵圆钳头部用纱布包裹，并连续不断地夹持大鼠尾巴末端1/3处，以此来激怒大鼠并使其相互厮打，如有夹持部位或厮打部位受伤，用沾取0.5%碘伏的无菌棉签涂擦以防感染。每次刺激持续30 min，每12小时重复进行1次；同时，配合单、双日不规则喂食，连续刺激21 d。造模结束后剔除死亡大鼠(死亡原因未知)，每组剩余9只，给予光影处置。

1.4.2 药物干预 各组药物以蒸馏水溶解，空白组和模型组以生理盐水2 ml灌胃，中药组予颗粒剂溶液16.275 g/(kg·d)，西药组予莫沙必利片溶液1.575 g/(kg·d)，每天2次，持续给药21 d。

1.4.3 标本采集 末次给药后，观察各组大鼠的一般状态。禁食不禁水24 h，将混有墨水的营养性半固体糊灌胃各组大鼠，灌胃容积为2 ml/只。灌胃后1 h，以10%水合氯醛腹腔麻醉，打开腹腔，以羊肠线结扎大鼠贲门及幽门处，剪取全胃，电子天平称重后记录。沿着胃大弯将胃体剪开，以0.9%生理盐水冲洗，滤纸拭干后，再次称重记录。部分胃窦组织剪取后，分别放入冻存管及多聚甲醛内备用。幽门至回盲部小肠部分剪取后展开，用软尺测量幽门至小肠内容物长度及小肠总长度。

2 结果

2.1 一般情况 除正常组外，各组大鼠均出现毛色光泽度变差、饮食质量减少以及活动度降低等现象。治疗结束后，模型组大鼠一般情况最差，各治疗组大鼠一般情况均有好转，但较空白组差。

2.2 各组大鼠胃肠动力比较 模型组大鼠胃内残留率高于空白组(P<0.05)；中药组和西药组大鼠胃内残留率低于模型组(P<0.05)，且中药组更低(P<0.05)。模型组大鼠小肠推进率低于空白组(P<0.05)；中药组和西药组大鼠小肠推进率高于模型组(P<0.05)，且中药组更高(P<0.05)。见表1。

表1 各组大鼠胃肠动力比较(%)

2.3 各组大鼠下丘脑及胃窦组织中5-HT3aR 蛋白表达(WB法)比较 模型组大鼠下丘脑及胃窦组织5-HT3aR 蛋白相对表达量低于空白组(P<0.05)；用药组大鼠下丘脑及胃窦组织5-HT3aR 蛋白相对表达量高于模型组(P<0.05)；中药组大鼠下丘脑及胃窦组织5-HT3aR 蛋白相对表达量较西药组明显增加(P<0.05)。见表2。

表2 各组大鼠下丘脑及胃窦组织中5-HT3aR蛋白表达比较

3 讨论

FD是消化科常见的功能性胃肠病，在我国占消化科门诊数量的40%左右[6]。FD以慢性、反复发作为特点，临床以持续或反复发作上腹痛、上腹胀、早饱、嗳气、恶心等症状为主要表现[7-8]。其发病机制复杂，BGP是目前较为公认的发病机制。BGP是由肠神经系统以及中枢神经系统构成的一个严密的神经-内分泌网络，其并非解剖学上的实际通路，而是功能性的通道。BGP异常可导致胃肠动力及感觉异常，而胃肠动力障碍及敏感性增高是FD的病理生理基础[1]。机体通过BGP的双向环路进行胃肠功能的调节称为脑-肠互动，脑-肠互动是通过BGA来实现的。

目前发现与FD相关的BGA有10余种，其中最主要的是5-HT。5-HT的各种生理作用与其受体关系密切。其在中枢内主要分布于下丘脑，其生理功能是参与睡眠觉醒、精神心理情绪方面的调控；在外周主要分布于胃肠道，其生理功能是参与胃肠道的感觉、运动和分泌[9-10]。5-HTR受体有7种，5-HT3R与胃肠道的传导及高敏感关系密切[11]。5-HT3R被激活后能促使胃动素的释放，经过神经元活化，增加乙酰胆碱的释放，从而增加肠道的运动功能。在此过程中，5-HT与5-HT3R结合后，引起感觉神经末梢去极化，这个过程又使得5-HT与内脏感觉具有了相关性。

根据FD的发病及临床表现，中医将其归属于“痞满”、“胃脘痛”的范畴，古今医家多认为FD的病位在胃，涉及肝、脾两脏，肝郁和脾虚是两个关键的病机：脾虚是基础，肝郁是条件[12]。《素问·宝命全形论》记载：“土得木而达”，强调了疏肝解郁、调畅气机的治法对脾虚的治疗作用。胃痛消痞方中，党参、茯苓、白术健脾燥湿，砂仁、延胡索芳香行散，薏苡仁利水渗湿，内金、焦山楂消积化食，肉桂、干姜温阳止痛，甘草以调和诸药。纵观全方共达疏肝理气、健脾和胃之功效。

本研究基于胃痛消痞方对FD患者的临床疗效，从胃肠动力和BGA水平探讨胃痛消痞方的作用机制。结果发现，造模组大鼠一般状态差，胃内残留率升高，小肠推进率明显减低，提示造模成功。经胃痛消痞方及莫沙必利治疗后，大鼠一般状态有所改变，胃内残留率下降，小肠推进率增加，胃窦及下丘脑组织中5-HT3aR蛋白表达增加。本研究结果进一步证明，胃痛消痞方可能通过调节5-HT3aR的表达而达到治疗FD的作用。