杨秀芳，简 洁

(桂林医学院药学院药理学教研室，广西 桂林 541100)

冠状动脉阻塞，心肌供氧不足，耗氧增加导致的心肌坏死是急性心肌梗死的基本病因。急性心肌梗死诱发因素众多，发病率逐年升高，严重威胁人类健康[1]。从来源广泛的中草药中分离高效低毒活性成分，用于防治心肌梗死，成为近年来该领域的一个研究热点[2-3]。自噬是一种保守的细胞自我降解的过程，在肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病等的发生发展中发挥重要的生物学效应。现代研究发现，长期严重的缺血/缺氧诱导的过度自噬会加重心肌损伤甚至引发心衰[4]。九龙藤是一种广西民族特色中草药，据报道，其提取物具有活血化瘀、抗炎、抗氧化和抗血小板聚集等多种药理作用[5]。课题组前期研究亦表明，九龙藤总黄酮(Bauhiniachampioniiflavones，BCF)对垂体后叶素所致心肌缺血具有保护作用，并可通过激活PI3K/Akt通路调控自噬减轻心肌缺血/再灌注损伤[6-8]，但BCF对心肌细胞缺血/缺氧损伤的作用尚未可知。

1 材料

1.1 H9c2大鼠心肌细胞购自上海中科院细胞库。

1.2 试剂九龙藤总黄酮：本室分离，总黄酮含量以芦丁计为82%，其分离纯化方法见文献[9]。卡托普利(Captopril，批号SLBM6819V)、氯喹(Chloroquine，CQ,批号BCBM9716V)、3-甲基腺嘌呤(3-Methyladenine，3-MA，货号M9281)与雷帕霉素(Rapamycin，Rapa，货号R8140)购自Sigma公司；胎牛血清(货号13011-8611-100mL)、高糖及无糖DMEM(批号2044490)购自Gibco公司；Giemsa染色液(批号20190606)、DAPI染色液(批号20181030)购自索莱宝生物科技公司；CCK-8试剂盒购于东仁化学科技上海有限公司(批号KH741)；cTnI试剂盒(批号W090186)与CK-MB试剂盒(批号Jun 2019)分别来自武汉华美生物公司和上海酶连生物科技公司；……